枯草芽孢杆菌和绿色木霉协同促进芹菜生长的研究.pdf

213 中国土壤与肥料 2020 2 doi 10 11838 sfsc 1673 6257 19187 枯草芽孢杆菌和绿色木霉协同促进芹菜生长的研究 周 游 1 2 杨腊英 1 2 汪 军 1 2 郭立佳 1 2 梁昌聪 1 2 刘 磊 1 2 黄俊生 1 2 1 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所 海南 海口 571101 2 农业农村部热带作物有害生物综合治理重点实验室 海南 海口 571101 摘 要 为了芹菜高产栽培的需要 利用枯草芽孢杆菌 BLG010 和绿色木霉 H06 对芹菜进行促生长试验 试验设置了蒸馏水处理 BLG010处理 H06处理 BLG010 H06处理 结果表明 BLG010和H06具有促进芹菜 生长协同增效的现象 因此 通过测定芹菜的防御酶活性和代谢物的变化来探明BLG010和H06对芹菜生长呈现 协同增效效果的原因 酶活性测定结果表明 相对于蒸馏水处理 BLG010和H06均能提高芹菜的CAT和POD活 性 并且BLG010 H06处理的CAT和POD活性均比蒸馏水处理 BLG010处理 H06处理高 利用GC MS技术 分析不同处理代谢物的结果表明 苹果酸 甘露醇和蔗糖这3种物质的含量在不同处理间呈现规律性差异 关键词 芹菜 促生长 酶活性 代谢物 芹菜 Apium graveolens L 富含蛋白质 维 生素 钙 磷 铁等20多种营养物质 是我国国 民广泛食用的蔬菜 1 2 随着对芹菜需求的日益加 大 不少学者通过提高大量元素供给 施用黄腐酸 钾和生长调节剂等物质 或者利用微生物等手段研 究提高芹菜产量的方法 3 6 前人研究表明 复合使用不同类型的微生物 比使用单一微生物对植物的促生和控制植物病害 的效果更好 呈现增效作用 7 9 可能的原因是 不同类型的微生物对植物和对病原菌的作用方式 不同 分泌的作用物质也不同 10 11 有研究表 明 不同种类的微生物共同培养后会加大有益物 质的分泌 例如Trichoderma asperellum和 Bacil lus amyloliquefaciens共同培养后会加大D 天冬氨 酸等8种氨基酸的分泌 12 并且不同种类菌株 共同培养时会诱导单独培养时沉默基因的表达 Schroeckh等发现 Streptomyces hygroscopicus 现 为 S rapamycinicus 和 Aspergillus nidulans共培养 后 能激活A nidulans沉默的polyketide synthase PKS 基因簇表达 13 值得注意的是 不同种类 收稿日期 2019 04 30 录用日期 2019 08 31 基金项目 国家重点研发计划 2017YFD0200900 中央级公益 性科研院所基本科研业务专项 1630042019038 作者简介 周游 1983 男 海南三亚人 助理研究员 博士 研究方向为植物病害生物防治 E mail zy563696 通讯作者 黄俊生 E mail h888111 菌株共同培养也能诱导产生新的物质 Dashti等 将 Actinokineospora sp 和 Nocardiopsis sp 共同培养 后分离出在单独存在的情况下不能产生的3种新物 质 14 但以往研究多关注于两种微生物之间的相 互作用结果 而关于复合微生物促进植物生长的协 同增效机制尚不清楚 且研究报道极为鲜见 木霉 和芽孢杆菌是目前广泛用来生产微生物菌肥的菌 种 因此 本研究通过比较绿色木霉和枯草芽孢杆 菌在单独和混合施用情况下 对芹菜的防御酶活性 和代谢物含量的影响情况来探明这两种微生物对芹 菜生长的协同增效作用的机制 这将为微生物的复 合使用提供理论基础 也为芹菜的高产栽培提供有 效的技术支撑 1 材料与方法 1 1 供试菌株 枯草芽孢杆菌 BLG010 专利号 CN102747020A 由中国热带农业科学院环境与植物保护研究所提 供 菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普 通微生物中心 保藏编号为CGMCC No 5953 将 BLG010接种在LB液体培养基中 在37 条件 下180 r min黑暗培养2 d后离心去除LB培养液获 得纯孢子体 并用无菌蒸馏水把孢子稀释成1 0 10 7 个 mL浓度的孢子悬浮液 绿色木霉 H06 专利号 CN102839131A 由中国热带农业科学院环境与植物保护研究所提 214 中国土壤与肥料 2020 2 供 保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微 生物中心 保藏编号为CGMCC No 6229 将H06 接种到PDA平板上 在27 条件下黑暗培养9 d 并刮取孢子用无菌蒸馏水制成孢子悬浮液 浓度为 1 0 10 7 个 mL 1 2 盆栽试验 2018年1月3日将长至5 6 cm的西芹幼 苗移栽至混合有灭菌的菜园土 营养土以及椰糠 作为栽培基质的花盆中 幼苗移栽时各花盆均施 用市购复合肥 N P K 15 15 15 1 900倍液 500 mL 移栽5 d后按以下4个处理浇灌芹菜 每 处理设3个重复 每个重复含12株芹菜 移栽 30 d后收获芹菜 测定株高和鲜重 蒸馏水处理 CK 每花盆浇灌300 mL 的 无菌蒸馏水 BLG010处理 每花盆浇灌300 mL的 BLG010 孢子悬浮液 1 0 10 7 个 mL H06处理 每花盆浇灌300 mL 的H06 孢子 悬浮液 1 0 10 7 个 mL BLG010 H06处理 每花盆浇灌各150 mL 的BLG010和H06孢子悬浮液 1 0 10 7 个 mL 1 3 酶活性测定 分别于处理后10 20 d时采集4个处理的距 离地面1 5 cm处茎秆用于提取总酶液 每6个 茎秆作为一个重复 根据吴卫等的方法获得含有 过氧化氢酶 CAT 和过氧化物酶 POD 的总酶 液 15 过氧化氢酶 CAT 活性利用H 2 O 2 测 定 16 过氧化物酶 POD 活性采用愈创木酚法 测定 17 1 4 差异代谢物GC MS分析 分别于处理后10 20 d时采集4个处理的距 离地面1 5 cm处茎秆用于代谢物检测 每6个 茎秆作为一个重复 气质联用仪型号为Thermo TRACE1310 ISQ TM QD GC MS 代谢物提取及衍生化 根据Lisec等的方法 提取代谢物 以核糖醇 0 2 mg mL 作为内标 18 利用甲氧基胺基盐酸盐吡啶溶液 吡啶含量为 20 mg mL 与N O 双 三甲基硅烷基 三氟乙酰 胺 含1 三甲基氯硅烷 对代谢物进行衍生化 色谱和质谱条件 毛细管色谱柱为Thermo TG 5MS 30 m 0 25 mm 0 25 m 不分流进 样 1 0 mL min恒流模式 升温程序为 初始温 度80 维持2 min 然后以5 min的速度升至 300 维持1 min 进样口温度设定为 250 EI 离子源 温度250 电子轰击电压为70 eV 质 谱检测范围为45 600 m z 每0 2 s扫描一次 溶 剂延迟3 min 样品采用随机顺序连续自动进样 数据处理 对样品的总离子图进行色谱峰识 别 并与NIST质谱数据库比对 鉴定代谢物的种 类 使用自动积分方法进行积分并进行手动积分校 正 对代谢产物进行的定性和定量分析 2 结果与分析 2 1 不同处理对芹菜生长的影响 由图1和图2可见 同时浇灌枯草芽孢杆菌 BLG010 和绿色木霉 H06 的处理比其它处理 长势良好 BLG010 H06处理的株高分别是CK BLG010 H06处理的1 44 1 13 1 21倍 株重分 别是CK BLG010 H06处理的3 4 1 39 2 07倍 这说明BLG010和H06对芹菜的促生具有协同增效 作用 图 1 不同处理对芹菜生长的影响 图 2 不同处理对芹菜株高和株重的影响 215 中国土壤与肥料 2020 2 2 2 不同处理对芹菜酶活性的影响 经过分析得知 CAT与POD活性在4个处 理间表现出规律性变化 由图3和图4可知 BLG010 H06处理的CAT和POD活性在第10 d和 第20 d时均比其它处理高 CK处理在第10 d和第 20 d时的POD和CAT活性均比其它处理低 图 3 不同处理对芹菜 CAT活性的影响 图 4 不同处理对芹菜 POD活性的影响 在 第10 d时 BLG010 H06处 理 的POD活 性分别为BLG010和H06处理的1 23和1 36倍 BLG010 H06处理的CAT活性分别为BLG010和 H06处理的1 03和1 4倍 在 第20 d时 BLG010 H06处 理 的POD活 性分别为BLG010和H06处理的1 25和1 22倍 BLG010 H06处理的CAT活性分别为BLG010和 H06处理的1 78和1 45倍 由结果可知 BLG010和H06均能提高芹 菜CAT和POD活性 但是同时浇灌BLG010和 H06比单独浇灌BLG010或H06对芹菜的CAT和 POD活性具有更强的诱导能力 这也说明BLG010 和H06对芹菜防御酶活性诱导具有协同增效 作用 2 3 不同处理对芹菜代谢物的影响 各处理样品的GC MS 总离子流色谱图峰 形较好 图5 可根据峰面积计算代谢物质 相对含量和通过NIST标准谱库确认各峰的化 学结构 由结果可知 苹果酸 甘露醇和蔗糖 这3种物质相对含量在不同处理间呈现规律性的 差异 与CK处理相比 BLG010 H06 BLG010 H06 处理的甘露醇含量在第10 d和20 d两个时间点 均上调表达 图6 处理间的含量大小顺序为 BLG010 H06 BLG010 H06 CK处理 由图7可知 与CK处理相比 BLG010 H06 处理的苹果酸含量在第10 d和20 d两个时间点均上 图 5 芹菜代谢物 GC MS总离子流色谱图 注 A CK处理 B BLG010处理 C H06处理 D BLG010 H06处理 216 中国土壤与肥料 2020 2 图 6 不同处理对芹菜甘露醇含量的影响 图 7 不同处理对芹菜苹果酸含量的影响 调表达 而BLG010处理 H06处理的苹果酸含量 在第10 d表达下调 但随后BLG010处理的苹果酸 含量在第20 d上调表达 由图8可知 在第10 d CK处理的蔗糖含 量分别是BLG010 H06 BLG010 H06处理蔗糖 含量的5 78 2 33和7 01倍 但是在第20 d时 BLG010 H06 BLG010 H06处理的蔗糖含量分别 是CK处理蔗糖含量的1 98 1 3和7 22倍 结果表明 接种枯草芽孢杆菌或绿色木霉均能 引起芹菜的苹果酸 甘露醇和蔗糖含量变化 而混 合接种枯草芽孢杆菌和绿色木霉则能导致这些变化 程度加大 3 结论与讨论 POD和CAT是植物生长过程中的重要抗性相 关酶 其活性变化情况是反映植物抗病性的重要 生理指标 19 20 众多学者利用生防菌接种寄主 植物来提高寄主的CAT和POD活性 由此使寄 主获得诱导系统抗性 Induced systemic resistance ISR 因此 测定枯草芽孢杆菌和绿色木霉在单 独和混合施用条件下对芹菜的CAT和POD活性影 响 能探明这两种生防菌对芹菜的防御酶是否有增 效作用 也间接为其它生防菌的复合使用提供理论 支撑 图 8 不同处理对芹菜蔗糖含量的影响 本研究发现枯草芽孢杆菌和绿色木霉均能提高 芹菜CAT和POD活性 且两者混合接种芹菜提高 这两种酶的活性更高 呈现增效作用 这可能是两 种生防菌对芹菜的刺激比单一生防菌的刺激作用 强 加强了激活CAT和POD活性的过程 这和前 人的报道类似 21 22 他们发现接种病原菌和芽孢 杆菌处理的CAT和POD等抗性相关酶活性比只单 独接种病原菌或者生防菌的高 本研究也发现 株高最高和株重最重的芹菜处 理 其CAT和POD活性也最大 这与吕斌等 23 和赵英等 24 的研究类似 他们发现POD和SOD 等抗性相关酶的活性与植物的生长势有相关关系 因此将来可以进行深入的研究 探清芹菜CAT和 POD活性与芹菜株高与株重的相关关系 作为预测 微生物提高芹菜产量能力的检测指标 代谢物的变化可视为植物对外界环境变化的响 应 研究植物响应外源微生物的代谢组不仅能描述 植物的状态 也能了解植物与微生物互作的机制 本文对4个处理的芹菜进行代谢组分析 结果发 现 苹果酸 甘露醇和蔗糖的含量在不同处理间呈 217 中国土壤与肥料 2020 2 现规律性的差异 这些差异变化是芹菜对枯草芽孢 杆菌和绿色木霉的响应 苹果酸是三羧酸 TCA 循环的中间产物 参 与多种代谢反应的调控 能生成蔗糖 丙酮酸 草 酰乙酸等物质 是一种重要的能量物质 25 本研 究中 在两个时间段 BLG010 H06处理的苹果 酸均比CK处理和其它处理高 这与董鲜等 26 和 张风革 27 的研究类似 他们发现植物接种微生物 后 其体内的苹果酸含量上调 造成这种现象的可 能原因是 芽孢杆菌和木霉对苹果酸具有趋化性 苹果酸可作为芽孢杆菌和木霉的营养来源之一 芹 菜加大苹果酸的分泌能促进这两种微生物在植物根 部定殖 27 28 也有可能是 在两种生防菌的共同 作用下 刺激芹菜上调苹果酸产量进而转化为糖 类 为芹菜的生长发育提供能量 从而达到显著促 进芹菜生长的目的 但是 第10 d时BLG010处理 和H06处理 第20 d时H06处理的苹果酸含量均 比CK处理低 具体机理有待进一步研究 本研究发现 BLG010和H06均能诱导芹菜甘 露醇累积 并且两种生防菌共同处理的芹菜甘露醇 相对含量比单一生防菌处理的高 这和Luo等 29 的研究结果类似 他们发现利用菌根真菌接种杨树 后 甘露醇在杨树体内累积 甘露醇是植物体内 重要的渗透压调节物质 30 微生物与植物作用后 会导致植物的渗透势发生改变 31 由此推测 芽 孢杆菌和木霉处理芹菜导致其甘露醇累积的原因 可能是 芹菜需要调节由这两种微生物造成的渗 透压失衡 故而加大甘露醇的分泌 并且两种微 生物比单一微生物使芹菜累积甘露醇的作用更强 但是甘露醇与芹菜生长势之间的关系需要进一步 研究 蔗糖能分解成果糖和葡萄糖 是植物体内重要 的能源物质也是分子信号 是源库碳水化合物代 谢的枢纽 能影响植物生长发育过程中的基因表 达 32 33 植物根系的蔗糖是木霉的能量来源 但 是木霉获得足够的蔗糖后就下调其自身的蔗糖水解 酶活性 以避免其对寄主蔗糖的过量吸收而导致寄 主组织的破坏 34 邹英宁等 35 研究表明 柑橘接 种丛枝菌根真菌能提高其株高和叶片数以及叶片蔗 糖含量 经分析得知菌根侵染率与叶片蔗糖含量正 相关 他们认为叶片产生的蔗糖向根部运输并分解 为葡萄糖和果糖供给菌根真菌吸收利用 本研究结 果表明 在第10 d时 各处理的蔗糖含量表现为 CK处理 BLG010处理 H06处理 BLG010 H06处 理 在第20 d时各处理的蔗糖含量出现反转 表现 为BLG010 H06处理 BLG010处理 H06处理 CK 这可能的原因是在枯草芽孢杆菌和绿色木霉定殖根 部初期 芹菜产生的蔗糖向下运输给这两种生防菌 使用 导致茎部蔗糖含量变低 当它们获得足够的 蔗糖后产生调节信号给芹菜 芹菜调节蔗糖相关酶 的活性 提高体内蔗糖含量用于促进自身生长 这 与刘春娟等 36 的研究类似 他们发现大豆叶片的 蔗糖含量与大豆的产量正相关 本研究中 BLG010 和H06联合接种对提高芹菜的蔗糖含量呈现出了增 效效应 这可能是BLG010和H06促进芹菜生长呈 现协同增效现象的原因之一 综上所述 本研究发现接种枯草芽孢杆菌 BLG010 和绿色木霉 H06 能促进芹菜的生长 并且同时接种BLG010和H06比单独接种BLG010 或H06促进芹菜生长的效果更好 同时还发现 芹 菜CAT和POD活性 苹果酸 甘露醇和蔗糖的含 量在不同处理间呈现规律性的差异 这些差异变化 可能是枯草芽孢杆菌和绿色木霉促进芹菜生长呈现 协同增效的原因 这些研究结果将为生防菌的复 合使用提供新思路 为芹菜的高产栽培提供技术 支撑 参考文献 1 郭春景 芹菜的营养价值与安全性评价 J 吉林农业 2018 6 83 84 2 梁颖 李艺 师薇 等 芹菜不同品种类型间营养成分及抗 氧化活性差异 J 食品工业科技 2018 39 18 60 63 3 冯雪 于泽娟 刘艳双 等 外源NO供体SNP对冬季温室 芹菜生长及硝酸盐含量的影响 J 湖北农业科学 2016 55 8 4717 4721 4 张弓长 蔡虎铭 钱程 等 水溶肥中添加聚天冬氨酸和黄 腐酸钾对芹菜产量及经济效益的影响 J 安徽农业科学 2016 44 33 103 105 5 张亚平 杜迎辉 杨庆锋 等 解淀粉芽孢杆菌对芹菜生长 的影响 J 中国果菜 2016 12 30 32 6 王慧俐 郑积荣 郑晓冬 印度梨形孢对芹菜的生长及营养 品质的影响 J 中国食品学报 2017 17 6 124 130 7 Akhtar N Goyal D Goyal A Biodegradation of leaf litter biomass by combination of Bacillus sp and Trichoderma reesei MTCC164 J Minerva Biotechnologica 2015 27 4 191 199 8 Kumar S P M Chowdappa P Krishna V et al Induction of defense related proteins and growth promotion in tomato by mixture of Trichoderma harzianum OTPB3 and Bacillus subtilis 218 中国土壤与肥料 2020 2 OTPB1 and Pseudomonas putida OPf1 against Phytophthora infestans J African Journal of Microbiology Research 2015 9 2 96 110 9 Alizadeh H Behboudi K Ahmadzadeh M et al Induced systemic resistance in cucumber and Arabidopsis thaliana by the combination of Trichoderma harzianum Tr6 and Pseudomonas sp Ps14 J Biological Control 2013 65 1 14 23 10 Woo S Fogliano V Scala F et al Synergism between fungal enzymes and bacterial antibiotics may enhance biocontrol J Antonie van Leeuwenhoek 2002 81 1 4 353 356 11 Xu X M Jeger M J Theoretical modeling suggests that synergy may result from combined use of two biocontrol agents for controlling foliar pathogens under spatial heterogeneous conditions J Phytopathology 2013 103 8 768 775 12 Wu Q Ni M Dou K et al Co culture of Bacillus amyloliquefaciens ACCC11060 and Trichoderma asperellum GDFS1009 enhanced pathogen inhibition and amino acid yield J Microbial Cell Factories 2018 17 1 155 167 13 Schroeckh V Scherlach K N tzmann H W et al Intimate bacterial fungal interaction triggers biosynthesis of archetypal polyketides in Aspergillus nidulans J Proceedings of the National Academy of Sciences 2009 106 34 14558 14563 14 Dashti Y Grkovic T Abdelmohsen UR et al Production of induced secondary metabolites by a co culture of sponge associated actinomycetes Actinokineospora sp EG49 and Nocardiopsis sp RV163 J Marine Drugs 2014 12 5 3046 3059 15 吴卫 徐应文 刘正琼 等 一种植物超氧化物歧化酶 过 氧化氢酶和过氧化物酶活力检测方法 CN201010224740 5 P 中国 2010 16 王晶晶 四川猕猴桃软腐病菌的鉴定 遗传多样性及侵 染果实后的生理变化研究 D 雅安 四川农业大学 2013 17 曹建康 蒋微波 赵玉梅 果蔬采后生理生化实验指导 M 北京 中国轻工业出版社 2007 18 Lisec J Schauer N Kopka J et al Gas chromatography mass spectrometry based metabolite profiling in plants J Nature Protocols 2006 1 1 387 396 19 李方球 官春云 油菜菌核病抗性鉴定 抗性机理及抗性遗 传育种研究进展 J 作物研究 2001 15 3 85 92 20 辛鑫 刘磊 潘江禹 等 绿色木霉H6对香蕉枯萎病的诱 导抗性作用 J 广东农业科学 2013 7 83 85 21 Youssef S A Tartoura K A Abdelraouf G A uation of Trichoderma harzianum and Serratia proteamaculans effect on disease suppression stimulation of ROS scavenging enzymes and improving tomato growth infected by Rhizoctonia solani J Biological Control 2016 100 79 86 22 Li C Y Hu W C Pan B et al Rhizobacterium Bacillus amyloliquefaciens strain SQRT3 mediated induced systemic resistance controls bacterial wilt of tomato J Pedosphere 2017 27 6 1135 1146 23 吕斌 陈学年 李质怡 等 不同砧木先锋橙叶片POD活 性与树体生长势的关系 J 西南农业学报 1999 12 2 63 67 24 赵英 唐玉娟 芒果叶片SOD CAT 活性与生长势的关系 J 农业研究与应用 2017 3 43 48 25 宋超 张立军 贾永光 等 植物的苹果酸代谢和转运 J 植物生理学通讯 2009 45 5 419 428 26 董鲜 郑青松 王敏 等 香蕉幼苗三类有机小分子溶质 对尖孢镰刀菌侵染的生理响应 J 生态学报 2015 35 10 3309 3319 27 张风革 哈茨木霉诱变菌株T E5及其生物有机肥对黄瓜生 长的影响及机理研究 D 南京 南京农业大学 2015 28 张楠 根际有益芽孢杆菌N11及SQR9与植物根系的互作研 究 D 南京 南京农业大学 2012 29 Luo Z B Janz D Jiang X et al Upgrading root physiology for stress tolerance by ectomycorrhizas insights from metabolite and transcriptional profiling into reprogramming for stress anticipation J Plant Physiology 2009 151 4 1902 1917 30 Hacham Y Hershenhorn J Dor E et al Primary metabolic profiling of Egyptian broomrape Phelipanche aegyptiaca compared to its host tomato roots J Journal of Plant Physiology 2016 205 11 19 31 刘业霞 姜飞 张宁 等 嫁接辣椒对青枯病的抗性及其 与渗透调节物质的关系 J 园艺学报 2011 38 5 903 910 32 樊晶 柑橘宿主对黄龙病病原菌侵染的应答机制 D 重 庆 重庆大学 2010 33 吴越 苏华楠 黄爱军 等 柑橘黄龙病菌侵染对甜橙叶片 糖代谢的影响 J 中国农业科学 2015 48 1 63 72 34 陈捷 木霉菌诱导植物抗病性研究新进展 J 中国生物防 治学报 2015 31 5 733 741 35 邹英宁 吴强盛 李艳 等 丛枝菌根真菌对枳根系形态和 蔗糖 葡萄糖含量的影响 J 应用生态学报 2014 25 4 1125 1129 36 刘春娟 冯乃杰 郑殿峰 等 植物生长调节剂S3307和 DTA 6对大豆源库碳水化合物代谢及产量的影响 J 中 国农业科学 2016 49 4 657 666 219 中国土壤与肥料 2020 2 Study of synergistic enhanced effect on promoting celery growth by Bacillus subtilis and Trichoderma viride ZHOU You 1 2 YANG La ying 1 2 WANG Jun 1 2 GUO Li jia 1 2 LIANG Chang cong 1 2 LIU Lei 1 2 HUANG Jun sheng 1 2 1 Environment and Plant Protection Institute Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences Haikou Hainan 571101 2 Key Laboratory of Pests Comprehensive Governance for Tropical Crops Ministry of Agriculture and Rural Affairs Haikou Hainan 571101 Abstract For the high yield cultivation of celery the growth promotion test of celery was carried out using Bacillus subtilis BLG010 and Trichoderma viride H06 and the test was pered with distilled water treatment BLG010 treatment H06 treatment and BLG010 H06 treatment The results showed that BLG010 and H06 had synergistic enhanced effect on promoting celery growth In order to find out the reasons for the synergistic enhanced effect of BLG010 and H06 the defensive enzyme activity and metabolomics of celery were analyzed The results of enzyme activity assay showed that both BLG010 and H06 increased the CAT and POD activities of celery compared with distilled water treatment and the CAT and POD activities of BLG010 H06 treatment were higher than those of other treatments The results of GC MS analysis of metabolomics showed that the contents of malic acid mannitol and sucrose showed regular changes in different treatments Key words celery growth promotion enzyme activity metabolomics 中 国 土 壤 与 肥 料 征 稿 简 则 中国土壤与肥料 1964 年创刊 是农业部主管 中国农业科学院农业资源与农业 区 划 研 究 所 和 中 国 植 物 营 养 与 肥 料 学 会 主 办的全国性专业科技期刊 为全国中文核心期刊 中国科技核心期刊 中国农业核心期刊 RCCSE 中国核心学术 期 刊 被 中 国 科学引文数据库 CSCD 核心库 中国学术期刊综合评价数据库 CBST 科学技术文献速报 日 中 国 学 术 期 刊 文 摘 CA 化学文摘 美 CABA 农业与生物科学研究中心文摘 英 等 收 录 以 促 进 土 肥 学 科 的 发 展 为 宗 旨 加 快 成 果 转 化 推 动 技 术进步为目标 面 向 科 研 教 学 和 生 产 实 践 主 要 刊 登 土 壤 资 源 与 利 用 植 物 营 养 与 施 肥 农 业 水 资 源 利 用 农 业 微 生 物 分 析 测 试 环 境 保 护 生 态 农 业 等 方 面 的 新 理 论 新 技 术 新 产 品 的 试 验 研 究 成 果 与 动 态 辟 有 专 家 论 坛 专 题 综 述 研 究 报 告 分 析 方 法 研 究 简 报 等 栏 目 读 者 对 象 为 农 业 科 研 教 学 推 广 环 保 及 肥 料 生 产 经 营 部 门 的 科 技 管 理 人 员 及 农 民 技 术 员 来 稿 要 求 和 注 意 事 项 1 文 稿 请 按 科 技 论 文 编 写 格 式 撰 写 要 求 论 点 明 确 层 次 分 明 数 据 可 靠 图 表 清 晰 文 字 精 炼 标 点 准 确 有 关 数 据 进 行 统 计 分 析 2 研 究 论 文 要 有 中 英 文 摘 要 和 关 键 词 摘 要 中 要 含 有 论 文 的 重 要 数 据 3 量 和 单 位 及 符 号 采 用 国 家 法 定 计 量 单 位 符 合 国 标 对 科 技 期 刊 的 要 求 不 再 使 用N M ppm rpm 亩 目 等 土 壤 的 磷 钾 养 分 含 量 需 用P K 计 算 肥 料 的 磷 钾 养 分 含 量 用P 2 O 5 K 2 O 计 算 4 图 表 要 有 自 明 性 不 要 求 英 文 标 注 表 格 采 用 三 线 表 格 式 图 一 律 为 黑 白 图 不 要 边 框 背 景 和 网 格 线 5 参 考 文 献 只 列 出 直 接 引 用 并 已 公 开 发 表 的 文 章 著 作 等 按 正 文 中 出 现 的 先 后 排 序 顺 序 编 码 制 文 献 序 号 加 方 括 号 在 引 用 处 以 上 标 方 式 标 注 中 文 文 献 不 要 求 英 文 注 释 文 献 作 者 只 写 前3 人 姓 名 超 过3 人 后 面 加 等 3 人 之 内 全 部 列 出 英 文 文 献 作 者 姓 名 姓 前 名 后 姓 第1 个 字 母 大 写 名 用 大 写 首 字 母 缩 写 大 写 字 母 后 不 加 点 6 在 首 页 脚 注 位 置 标 注 基 金 项 目 第 一 作 者 简 介 以 及 通 讯 作 者 姓 名 和 信 箱 作 者 简 介 姓 名 出 生 年 性 别 民 族 汉 族 可 省 略 籍 贯 学 位 职 称 研 究 方 向 E mail 7 以word 格 式 A4 纸 型 排 版 通 过 本 刊 网 站 远 程 稿 件 处 理 系 统 在 线 投 稿 并 可 查 看 稿 件 处 理 进 程 及 录 用 情 况 8 文 稿 著 作 权 属 于 作 者 文 责 作 者 自 负 本 编 辑 部 为 保 证 文 稿 的 规 范 和 精 练 可 对 内 容 进 行 必 要 的 修 改 删 节 作 者 如 有 不 同 意 见 可 在 来 稿 中 注 明 9 文 稿 请 勿 一 稿 多 投 论 文 经 初 审 通 过 后 收 取 审 理 费 并 送 专 家 评 审 主 编 终 审 论 文 一 经 录 用 确 定 刊 期 后 收 取 稿 件 处 理 费 刊 出 后 付 给 作 者 稿 酬 并 赠 送2 本 当 期 期 刊 论 文 刊 出 后 同 时 以 网 络 方 式 发 布 江 苏 省 淮 安 大 华 生 物 科 技 有 限 公 司 为 您 提 供 高 效 绿 色 环 保 发 酵 剂 酵 素 菌 速 腐 剂 许 可 证 号 微 生 物 肥 2003 准 字 0107 号 国 环 有 机 农 业 生 产 资 料 认 证 号 OP 0109 932 201 淮 安 市 大 华 生 物 科 技 有 限 公 司 是 以 研 制 生 产 酵 素 菌 系 列 微 生 物 制 品 为 主 的 科 技 型 企 业 集 科 研 生 产 销 售 于 一 体 技 术 力 量 雄 厚 设 备 先 进 设 施 完 善 本 公 司 主 要 产 品 微 生 物 发 酵 剂 酵 素 菌 速 腐 剂 是 采 用 生 物 技 术 制 成 的 一 种 好 兼 气 性 复 合 微 生 物 制 剂 高 效 绿 色 环 保 内 含 大 量 有 益 微 生 物 活 性 酶 适 用 于 秸 秆 腐 熟 畜 禽 粪 便 处 理 垃 圾 堆 肥 污 泥 堆 肥 和 饼 粕 肥 农 家 肥 等 有 机 物 固 体 发 酵 和 人 畜 粪 便 液 体 发 酵 是 生 产 有 机 生 物 肥 的 优 质 高 效 发 酵 剂 主 要 功 效 1 发 酵 分 解 能 力 强 快 速 腐 熟 有 机 材 料 2 改 良 土 壤 增 强 地 力 3 增 产 效 果 显 著 4 减 轻 病 虫 害 克 服 连 作 障 碍 5 改 善 农 产 品 品 质 我 公 司 可 为 生 物 有 机 肥 生 产 厂 家 提 供 发 酵 原 料 配 比 工 艺 等 资 料 机 插 秧 育 苗 专 用 肥 机 插 水 稻 育 苗 基 质 苏 农 肥 2005 准 字0365 02 号 机 插 水 稻 育 苗 基 质 拌 土 型 是 根 据 无 土 栽 培 学 植 物 营 养 学 肥 料 学 土 壤 微 生 态 学 原 理 研 制 而 成 内 含 有 多 种 有 益 微 生 物 有 机 物 及 植 物 所 需 的 大 量 微 量 平 衡 营 养 元 素 既 是 一 种 栽 培 基 质 又 是 一