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肉桂精油对辣椒疫霉菌的生物活性.pdf

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肉桂精油对辣椒疫霉菌的生物活性.pdf

343461-468 中国生物防治学报 Chinese Journal of Biological Control 2018 年 6 月 收稿日期 2017-11-09 基金项目国家自然科学基金( 31371962) ,河南省科技创新人才基金( 134100510009) 作者简介王海娇,硕士研究生, E-mail ; *通信作者,周琳,教授, E-mail ;赵特,讲师, E-mailT。 DOI 10.16409/ki.2095-039x.2018.03.003 肉桂精油对辣椒疫霉菌的生物活性 王海娇1,王轶楠1,高 飞1,段鹏飞2,刘向阳1,游秀峰1,姚伦广2,赵 特1*,周 琳1*( 1. 河南农业大学植物保护学院 /河南省新型农药创制与应用重点实验室,郑州 450002; 2. 南阳师范学院南水北调中线水源区水安全河南省协同创新中心 /河南省南水北调中线水源区生态安全重点实验室,南阳 473061) 摘要 为了研究肉桂精油对辣椒疫霉菌 Phytophthora capsici 的生物活性,离体条件下测定了肉桂精油对辣椒疫霉菌各个生长发育阶段的影响;观察了处理后供试菌菌丝形态结构的变化;测定了对菌丝体细胞膜通透性的影响;盆栽试验测定了药剂对辣椒疫病的防治效果。结果表明,肉桂精油对辣椒疫霉菌菌丝生长的有效中浓度 ( EC50) 为 111.89 mg/L; 对病菌孢子囊产生的 EC50为 61.09 mg/L; 对孢子囊萌发的 EC50为 95.14 mg/L;对游动孢子萌发的 EC50为 54.88 mg/L。肉桂精油可显著降低辣椒疫霉菌菌丝的鲜重和干重,并使菌丝分支增多、变短;亦能提高该菌的细胞膜通透性。盆栽试验表明,肉桂精油对辣椒疫病具有很好的保护和治疗作用。可见,肉桂精油对辣椒疫霉菌具有明显的抑制作用,在防治辣椒疫病上具有较大的应用潜力。 关 键 词 肉桂精油;辣椒疫霉;发育阶段;毒力;防效 中图分类号 S476 文献标识码 A 文章编号 1005-9261201803-0461-08 Anti-oomycete Activity of Cinnamon Essential Oil against Phytophthora capsici WANG Haijiao1, WANG Yinan1, GAO Fei1, DUAN Pengfei2, LIU Xiangyang1, YOU Xiufeng1,YAO Lunguang2, ZHAO Te1*, ZHOU Lin1*1. College of Plant Protection, Henan Agricultural University/Creation and Application of Novel Pesticides of Henan Province, Zhengzhou 450002, China; 2. Collaborative Innovation Center of Water Security for Water Source, Region of Mid-line of South-to-North Diversion Project, Henan Province/Key Laboratory of Ecological Security for Water Source Region of Mid-line of South-to-North Diversion Project of Henan Province, Nanyang 473061, China Abstract The aim of this study was to uate the effectiveness of cinnamon essential oil on controlling pepper blight caused by Phytophthora capsici. The toxicities of the essential oil against P. c a p s i c i at their four different life stages were examined in vitro conditions and the control efficacies were also investigated in vivo conditions. Moreover, morphology and structure of mycelial treated with the essential oil were observed and the effect of the essential oil on the permeability of the cell membrane was determined. The results showed that the EC50value of cinnamon essential oil against the mycelial growth was 111.89 mg/L. The oil could effectively inhibit sporangium ation, sporangium germination and zoospore germination with EC50values of 61.09 mg/L, 95.14 mg/L and 54.88 mg/L, respectively. The zoospore of the tested pathogen strain was sensitive to the cinnamon essential oil. The mycelial fresh weight and dry weight were significantly decreased by the essential oil. Morphological and structural observation showed that cinnamon essential oil caused the excessive branching and shortening of hyphae. The conductivity of mycelia cell suspension increased in the presence of the essential oil, indicating that the oil affected the cell membrane permeability. The conductivities of mycelia treated by essential oil at four concentrations increased with time, significantly higher than that of control. The above results showed that cinnamon essential oil 462 中 国 生 物 防 治 学 报 第 34 卷 had good protective and therapeutic effects on pepper blight, and the protective effect was stronger than the therapeutic effect. Therefore, cinnamon essential oil is worthy of further study and has a strong application potential. Key words cinnamon essential oil; Phytophthora capsici; life stage; toxicity; control efficacy 由辣椒疫霉菌 Phytophthora capsici 引起的植物病害已成为世界各地蔬菜生产的主要制约因素[1,2]。 该病菌危害茄科、葫芦科和豆科的多种蔬菜和其他植物,共计 50 多种[3,4],可侵染植株的各个部位,引起植株枯萎、根腐、颈腐、幼苗猝倒、叶枯、茎枯和果腐等多种症状[5]。目前生产上防治辣椒疫病最常用的措施仍是施用杀菌剂[6]。 20 世纪 80 年代后开始使用内吸性杀菌剂甲霜灵、杀毒矾 M8、氰霜唑等防治辣椒疫病效果较好,但随着这些药剂的长期使用,病菌的抗药性已逐渐产生[7-9]。辣椒疫病的防治仍然面临着巨大挑战。因此,发掘新的杀菌活性物质对辣椒疫病的综合治理具有重要意义。已有研究表明,多种植物精油显示出很强的抗真菌性能, 具有较大的应用潜力[10-15]。 肉桂精油是从肉桂 Cinnamomum cassiao, 樟科 Lauraceae樟属 Cinnamomum 中提取的具芳香气味的挥发性物质,具有较强的抗菌和抗氧化活性,在食品和医药领域的研究应用较多[16]。研究表明肉桂精油对多种植物病原真菌,如禾谷镰刀菌 Fusarium graminearum、番茄灰霉病菌 Botrytis cinerea、苹果青霉病菌 Penicillium expansum、番茄茎枯病菌 Ahernaria alternata、黄瓜镰刀菌 Fusarium oxysporum f. sp. cucumaium 等有较强抑菌活性[17-21]。肉桂精油的主要成分有肉桂醛(亦称桂皮醛)、丁香酚、樟脑、菘萜、乙酸肉桂酯等。然而,关于肉桂精油及其主要成分对辣椒疫霉菌的抑菌作用鲜有研究报道。刘丽等[22]研究了肉桂醛对辣椒疫霉菌丝的径向生长和孢子萌发的影响,并对其抑菌机制进行了初步探讨;薛延丰等[23]发现了肉桂醛灌根 3 次后对辣椒疫病的防效显著大于对照药剂甲霜灵。作者前期筛选了 20 多种植物精油对辣椒疫霉菌的抑菌活性(另文发表),发现 0.5 g/L 肉桂精油处理 1~ 5 d 均可完全抑制菌丝生长,所用精油以肉桂枝叶为原料采用水蒸气蒸馏提取而得,经 GC-MS 分析桂皮醛含量为 80。为了进一步评价以桂皮醛为主成分的肉桂精油对辣椒疫霉菌不同生长发育阶段的抑制活性及对辣椒疫病的防治效果,采用离体活性测定方法系统测试了其对辣椒疫霉菌的菌丝生长、游动孢子囊形成和萌发以及游动孢子萌发的毒力,研究了其对菌丝的生长量、形态结构和细胞膜通透性的影响,采用离体叶片法和灌根法分别测定了肉桂精油对辣椒疫病的保护作用和治疗作用,为肉桂精油作为植物源杀菌剂的开发利用奠定基础。 1 材料与方法 1.1 试验材料 供试辣椒疫霉菌 P. capsici 由河南省新型农药创制与应用重点试验室提供。 肉桂精油是采用水蒸气蒸馏的方法从购自江西吉安的桂皮枝叶中提取,其中桂皮醛含量 80;对照药剂 250 g/L 嘧菌酯悬浮剂由华北制药河北华诺有限公司提供。豫甜大甜椒由河南豫艺种业科技发展有限公司提供。 10 V8 培养基 100 mL V8 汁 ( V8 浓缩混合蔬菜汁, 美国 CAMPBELL 公司生产) 加入去离子水 900 mL,CaCO31.5 g,琼脂 20 g。 10 V8 培养液 100 mL V8 汁加入去离子水 900 mL, CaCO30.02 g。 1.2 肉桂精油对辣椒疫霉菌菌丝生长的影响 参照慕立义等[24]的生长速率法,计算肉桂精油对辣椒疫霉菌菌丝生长的抑制率,并根据几率值分析法求毒力回归方程和有效中浓度( EC50)。同时,在光学显微镜下观察菌丝形态。 1.3 肉桂精油对辣椒疫霉菌孢子囊形成、释放及游动孢子萌发的影响 参照 Matheron 和 Porchas[25]的方法测定肉桂精油对辣椒疫霉菌游动孢子囊形成和萌发的影响;采用悬滴法[24]测定肉桂精油对辣椒疫霉菌游动孢子萌发的影响。根据下列公式计算药剂对辣椒疫霉菌孢子囊形成、释放及游动孢子萌发的抑制率,并根据几率值分析法求毒力回归方程和有效中浓度( EC50)。 抑制率( )=(对照组处理组) /对照组 100。 第 3 期 王海娇等肉桂精油对辣椒疫霉菌的生物活性 463 1.4 肉桂精油对辣椒疫霉菌菌丝生长量的影响 根据肉桂精油对辣椒疫霉菌的 EC50, 先用含 0.5丙酮与 0.5吐温- 80 的无菌水配制精油母液, 取 1 mL药液和 9 mL V8 液体培养基于灭菌培养皿(直径 9 cm)中混匀,使其终浓度为 EC50( 111.89 mg/L)和 EC90( 172.59 mg/L),每皿放置 5 个菌饼。以 1 mL 含 0.5丙酮与 0.5吐温- 80 的无菌水和 9 mL V8 液体培养基混匀作为对照,每处理重复 3 次,置 25 ℃恒温箱中黑暗培养 3 d 后,用滤纸滤去培养液,每个菌丝团用50 mL 无菌水洗菌 3~ 4 次,除去表面多余水分,滤去菌饼,称量菌丝鲜重,计算鲜重抑制率。然后将菌丝丛放入烘箱中, 60 ℃烘干 2 h,待冷却后称量其干重,计算干重抑制率。 1.5 肉桂精油对辣椒疫霉菌菌丝细胞膜通透性的影响 采用电导率法测定[26]。用灭菌的蒸馏水将肉桂精油配制为 50、 200、 300、 500 和 1000 mg/L 的药液,将在 V8 培养液中培养 3 d 的辣椒疫霉菌菌丝去除菌饼,用蒸馏水洗涤 3 次,并用布氏漏斗抽干其表面上的培养液和水分,分别称取 0.1 g 菌丝放入 10 mL 上述系列浓度的药液中,以无菌蒸馏水为对照,在室温中,于 0、 5、 10、 30、 60、 90、 120、 180 和 360 min 测定其电导率。每处理重复 3 次。 1.6 肉桂精油对辣椒疫病的保护作用和治疗作用 肉桂精油对辣椒疫病的保护作用和治疗作用分别采用离体叶片法[27]和灌根法[28]测定。 1.6.1 离体叶片法 选择叶龄相同和大小一致的辣椒叶片, 连同叶柄剪下, 肉桂精油浓度为 100、 200 mg/L。保护作用试验喷药 24 h 后接种,每片叶子接种直径 0.5 cm 菌饼 1 个,治疗作用试验接种 24 h 后喷药,施药量为 1 mL/叶。以 80 mg/L 的嘧菌酯药液为标准药剂对照,以蒸馏水为空白对照,每处理 3 次重复,每重复选取 5 片叶子。以在 25 ℃下光照 /黑暗交替培养 3 d,根据彭化贤等[29]室内离体叶片鉴定病情分级标准调查病情指数。计算不同处理的病情指数和相对防效。 1.6.2 灌根法 选择长势均一、 6~ 8 片真叶的盆栽辣椒植株,用注射器分别将浓度为 500、 1000 mg/L的精油药液 10 mL 在距离根茎 3 cm 处灌根, 24 h 后将 5 mL 游动孢子悬浮液(浓度为 1 104 个 /mL)注入相同位置。治疗作用试验接种 24 h 后灌药。以 800 mg/L 的嘧菌酯药液为标准药剂对照,以蒸馏水为空白对照。每处理 3 次重复,每重复 3 盆植株。 24 h 后适时浇水以保证土壤湿度近饱和状态,温度保持在 25~ 28 ℃, 7 d 后根据王进强等[30]的分级标准鉴定病情。计算不同处理病情指数,评价药剂的防治效果。 1.7 数据统计与分析 试验数据采用 SPSS 17.0 软件进行统计分析,应用 Duncan 氏新复极差法进行差异显著性检验。 2 结果与分析 2.1 肉桂精油对辣椒疫霉菌菌丝生长的影响 肉桂精油对辣椒疫霉菌菌丝生长具有明显的抑制活性,且随着精油浓度的升高抑制活性增强(图 1)。当肉桂精油浓度升为 175 mg/L 时,辣椒疫霉菌丝生长抑制率达 91.75,当其升高到 200 mg/L 时,则完全抑制了辣椒疫霉菌丝的生长。 由此计算得到肉桂精油抑制辣椒疫霉菌丝生长的 EC50为 111.89 mg/L(表 1) 。 进一步用 EC50的肉桂精油处理辣椒疫霉菌后,在显微镜下观察发现,肉桂精油对辣椒疫霉菌的抑制作用是改变菌丝的生长形态,表现为菌丝形态发生异常,顶端生长受到抑制,菌丝伸长生长减慢,长度明显缩短,分支明显增多、短小,而正常菌丝分支均匀(图 2)。 2.2 肉桂精油对辣椒疫霉菌孢子囊形成的影响 肉桂精油可有效抑制辣椒疫霉菌孢子囊的形成,且精油浓度越高,抑制作用越强。低浓度肉桂精油处理下,辣椒疫霉孢子囊仍有不同程度的萌发,但当精油浓度升高到 200 mg/L 时,则孢子囊几乎不能形成(图 3)。其毒力回归方程为 Y= 3.3921+ 0.9003X,相关系数为 0.9866, EC50为 61.09 mg/L, 95的置信区间为 51.13~ 73.00 mg/L(表 1)。 2.3 肉桂精油对辣椒疫霉菌孢子囊萌发的影响 不同浓度的肉桂精油对辣椒疫霉孢子囊萌发具有不同程度的影响,表现为浓度依赖性。当肉桂精油浓度高于 100 mg/L 时,孢子囊萌发抑制率接近 50,当精油浓度升到 150 和 200 mg/L 时,其对孢子囊萌 464 中 国 生 物 防 治 学 报 第 34 卷 抑制率Inhibition 注图中数据为平均数标准差。图中标有不同字母者表示在 0.05 水平上差异显著( Duncan 氏新复极差法);下图同。 Note The data were mean SE. Different lowercase letters indicated significant differences at 0.05 level by Duncan’s new multiple range test. The notes in the following figures were same with Fig.1. 图 1 肉桂精油对辣椒疫霉菌菌丝生长的影响( 5 d) Fig. 1 Inhibition of different concentrations of cinnamon essential oil against mycelial growth of P. capsici 5 d ABA对照 Control; B处理 Treatment 图 2 肉桂精油处理 3 d 时对辣椒疫霉菌菌丝形态的影响( 400 ) Fig. 2 Effect of cinnamon essential oil on the mycelial shape of P. capsici on the third day under optical microscope 400 abccdef0204060801006.25 12.5 25 50 100 150 200浓度 Concentration mg/L图 3 肉桂精油对辣椒疫霉菌孢子囊形成的影响 Fig. 3 Inhibition of cinnamon essential oil against sporangiurn ation of P. capsici 发的抑制率分别提高到 64.16和 78.85(图 4)。由此求出肉桂精油对辣椒疫霉菌孢子囊萌发的 EC50为95.14 mg/L(表 1)。 2.4 肉桂精油对辣椒疫霉菌游动孢子萌发的影响 肉桂精油对辣椒疫霉菌游动孢子萌发具有强烈的抑制作用 (图 5) 。 其回归方程为 Y=- 2.8500+ 4.5131X( r= 0.9925), EC50为 54.88 mg/L, 95的置信区间为 50.92~ 59.14 mg/L(表 1)。 第 3 期 王海娇等肉桂精油对辣椒疫霉菌的生物活性 465 抑制率Inhibition 图 4 肉桂精油对辣椒疫霉菌孢子囊萌发的影响 Fig. 4 Inhibition of cinnamon essential oil against sporangiurn germination of P. capsici 抑制率Inhibition图 5 肉桂精油对辣椒疫霉菌游动孢子萌发的影响 Fig. 5 Inhibition of cinnamon essential oil against zoospore germination of P. capsici 表 1 肉桂精油对辣椒疫霉菌菌丝生长、孢子囊形成和萌发以及游动孢子萌发的毒力 Table 1 Toxicities of cinnamon essential oil against mycelium growth, sporangium ation, sporangium germination and zoospore germination of P. capsici 发育阶段 Life cycle 毒力回归方程 Regression equation 相关系数 r EC50( 95置信限) EC5095 FL mg/L 卡方值 χ2菌丝生长 Mycelia growth Y=- 6.2200+ 5.4764X 0.9845 111.89( 85.41~ 146.58) 1.64 孢子囊形成 Sporangia ation Y= 3.3921+ 0.9003X 0.9866 61.09( 51.13~ 73.00) 6.45 孢子囊萌发 Sporangia germination Y= 1.1680+ 1.9370X 0.9890 95.14( 76.85~ 117.18) 4.90 游动孢子萌发 Zoospore germination Y=- 2.8500+ 4.5131X 0.9925 54.88( 50.92~ 59.14) 3.38 2.5 肉桂精油对辣椒疫霉菌菌丝生长量的影响 在含肉桂精油浓度为 EC50( 111.89 mg/L)和 EC90( 172.59 mg/L)的 V8 培养液中,辣椒疫霉菌的菌丝生长均受到明显抑制。 EC90处理组的辣椒疫霉菌几乎完全被抑制, EC50处理组的辣椒疫霉菌丝的鲜重与干重抑制率分别为 26.42与 29.84(表 2)。 2.6 肉桂精油对辣椒疫霉菌细胞膜通透性的影响 在所测定的 360 min 内, 50、 200、 300 和 500 mg/L 4 个浓度肉桂精油处理的辣椒疫霉菌丝体的电导率均随时间的推移而呈上升趋势。其中,精油浓度为 50 mg/L 时,在 5、 10、 30、 60、 90、 120、 180 和360 min 的处理时间点,菌丝体的电导率分别为 72.83、 91.40、 110.07、 117.63、 126.27、 132.73、 138.90和 150.23 μs/gcm,呈现逐渐提高的趋势,且均显著高于对照,表明细胞内含物通过细胞膜在不断地从细胞内渗漏到溶液中,即细胞膜的通透性逐渐变大,细胞膜的选择透过性遭到了破坏,细胞膜在丧失其应有的功能。而当精油浓度提高到 200~ 500 mg/L 时,菌丝体的电导率明显高于对照,但与 50 mg/L 相比无明显差异(图 6)。 466 中 国 生 物 防 治 学 报 第 34 卷 表 2 肉桂精油对辣椒疫霉菌菌丝生物量的影响 ( 3 d) Table 2 Effects of cinnamon essential oil against mycelial biomass of P. capsici 3 d 供试浓度 Concentration 鲜重 Fresh weight mg 鲜重抑制率 Inhibition of fresh weight 干重 Dry weight g 干重抑制率 Inhibition of dry weight EC5046.02 0.13 b 26.38 2.10 a 1.74 0.02 b 29.53 5.47 a EC900.13 0.06 c 99.79 0.09 b 0.00 0.00 c 100.00 0.00 b 对照 Control 62.54 1.64 a - 2.48 0.21 a - 注表中数据为平均值标准差。同列数据后标不同字母者表示在 0.05 水平上差异显著( Duncan 氏新复极差法);下表同。 Note The data were presented as mean SE. Different lowercase letters in the same column indicated significant differences at 0.05 level by Duncan’s new multiple range test. The notes in the following tables were same with table 2. 0204060801001201401601800 5 10 30 60 90 120 180 360电导率Conductivity s/gcm时间 Time minControl50 mg/L200 mg/L300 mg/L500 mg/L图 6 肉桂精油对辣椒疫霉菌菌丝细胞膜通透性的影响 Fig. 6 Effects of different concentrations of cinnamon essential oil on membrane permeability of P. capsici 2.7 肉桂精油对辣椒疫病的保护作用和治疗作用 离体叶片法测定结果表明, 肉桂精油对辣椒疫病具有很好的保护和治疗作用, 当肉桂精油浓度为 200 mg/L时,其保护效果和治疗效果分别达 70.37和 66.67,显著高于对照药剂 80 mg/L 嘧菌酯的防效( 62.97和 53.33) 。 灌根法测定结果表明, 精油浓度为 500 和 1000 mg/L 时, 其保护效果分别达到 61.49和 75.51,与对照药剂的防效均无显著差异;当精油浓度为 500 mg/L 时,治疗效果与对照药剂相当,当精油浓度提高到 1000 mg/L 时,治疗效果达 64.06,则显著高于对照(表 3)。 表 3 肉桂精油对辣椒疫病的保护作用和治疗作用 ( 7 d) Table 3 Protective and therapeutic effects of cinnamon essential oil against phytophthora blight of pepper 7 d 保护作用 Protective effects 治疗作用 Therapeutic effects 测定方法 供试药剂 Chemicals 供试浓度 Concentration mg/L 病情指数 Disease index 相对防效 Relative efficacy 病情指数 Disease index 相对防效 Relative efficacy 200 26.67 70.37 a 33.33 66.67 a 肉桂精油 Cinnamon oils 100 46.67 48.14 c 56.5 43.50 c 嘧菌酯 azoxystrobin 80 33.33 62.97 b 46.67 53.33 b 离体叶片法 In vitro leaf 空白对照 Control 0 90.00 - 100.00 - 1000 20.00 75.51 a 32.35 64.06 a 肉桂精油 Cinnamon oils 500 31.45 61.49 b 46.67 48.14 b 嘧菌酯 azoxystrobin 800 21.35 73.86 ab 50.00 44.44 b 灌根法 Root-drenchong 空白对照 Control 0 81.70 - 90.00 - 第 3 期 王海娇等肉桂精油对辣椒疫霉菌的生物活性 467 3 讨论 由辣椒疫霉菌引起的辣椒疫病是辣椒上的一种毁灭性土传病害,在全世界蔬菜产区危害极大,造成辣椒减产,甚至大面积绝收,该病对我国辣椒产区也已造成严重危害。目前生产上缺乏抗疫病的辣椒品种,防治疫病主要靠化学防治和规范化栽培措施,但效果甚微。本研究发现桂皮醛含量为 80的肉桂精油不仅可有效抑制辣椒疫霉菌游动孢子囊的形成和释放,其 EC50分别为 61.09 和 95.14 mg/L;对已释放的游动孢子萌发的抑制作用最强,其 EC50为 54.88 mg/L;对菌丝生长的 EC50为 111.89 mg/L,显微观察发现,肉桂精油通过改变菌丝生长形态而抑制菌落的扩展;肉桂精油处理后辣椒疫霉菌丝体细胞膜的选择透过性亦遭到破坏。离体叶片试验和盆栽试验结果表明,该精油对辣椒疫病同时具有良好的保护作用和治疗作用。可见,肉桂精油对辣椒疫霉菌具有较强的抑菌活性,是一种有效的辣椒疫霉菌的抑制剂,在病害发生的不同阶段均可用于辣椒疫病的综合治理,尤其在孢子囊形成之前施用可有效抑制病原菌的再侵染及病害的发展蔓延。 肉桂精油从肉桂的叶、枝、根、果实、花蕾和树皮中均可提取得到,但提取部位不同,其主要成分也不相同。叶片提取油最主要的成分是丁香酚,桂枝提取油中主要含桂皮醛,根部提取油则富含樟脑,果实提取油中含大量的菘萜、乙酸肉桂酯,花蕾提取油主成分为乙酸肉桂酯,而树皮提取油多含肉桂醛、樟脑油[31],且不同部位的树皮,其主要成分也存在差异[32]。肉桂精油中肉桂醛对辣椒疫霉菌的抑制作用已有研究报道[22,23]。但与前人研究不同的是,本试验所用肉桂精油是以 80桂皮醛为主要成分,研究明确了其对辣椒疫霉菌 4 个不同生长发育阶段的抑菌活性强度和对辣椒疫病的防治效果,其中对辣椒疫霉菌丝生长的EC50为 111.89 mg/L,低于刘丽等[22]关于肉桂醛对辣椒疫霉菌丝径向生长的 EC50( 132 mg/L),而与李丽娜等[33]测定肉桂醛对辣椒疫霉 NJ01 菌株的 EC50( 0.81 mmol/L,即 107.05 mg/L)非常接近。本文所用肉桂精油为多种化学成分的混合物,除了主要活性成分桂皮醛外,其他的一种或几种成分亦可能具有抑菌效果,或各成分之间也可能存在增效或拮抗作用,因此,想要明确肉桂精油中的抑菌活性成分,尚需采用活性追踪与化学分离相结合的方法对肉桂精油中的活性化合物进行分离和鉴定,为新抗菌剂的开发提供必要的理论参考。本研究通过离体叶片法和灌根法明确了肉桂精油对辣椒疫病具有很好的保护和治疗作用。离体叶片法测定结果表明, 200 mg/L 肉桂精油的保护和治疗作用分别达 70.37和 66.67,显著高于对照药剂 80 mg/L 嘧菌酯的防效( 62.97和 53.33);灌根法测定结果表明, 500 mg/L 精油对辣椒疫病的保护和治疗作用均达 60以上,与对照药剂嘧菌酯的防效相当, 1000 mg/L 精油的治疗效果达 64.06,显著高于嘧菌酯。这与薛延丰等[23]发现肉桂醛灌根 3 次后对辣椒疫病的防效显著大于对照药剂甲霜灵一致。李丽娜等[33]研究认为,肉桂醛在防治辣椒疫病的过程中,除了其抑菌作用外,还可能通过抑制辣椒疫霉菌对辣椒植株的侵染能力,同时调控辣椒植株的防卫反应,进而提高辣椒对疫病的抗性。因此,关于肉桂精油及其主要成分对辣椒疫病的防病作用原理值得进一步深入研究。 参 考 文 献 [1] Kousik C S, Donahoo R S, Hassell R. 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