两种叶幕类型‘摩尔多瓦’葡萄套袋果实花色苷代谢的差异.pdf

p园艺学报， 2018， 45 3 457– 470. Acta Horticulturae Sinica nbsp; doi 10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0454； http //www. ahs. ac. cn nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;457 收稿日期 2017– 10– 16； 修回日期 2018– 02– 26 基金项目 国家现代农业产业技术体系建设专项资金项目 （ CARS-29-zp-230） ； 山东省 “双一流” 建设奖补资金项目 （ SYL2017YSTD10） ；长江学者和创新团队发展计划项目（ IRT15R42） nbsp;* 通信作者 nbsp;Author for correspondence（ E-mail ） nbsp;两种叶幕类型‘摩尔多瓦’葡萄套袋果实花色苷代谢的差异 nbsp;刘笑宏1,2，肖秋红2，孙永江2，杜远鹏2，翟 nbsp;衡2,*（1山东省烟台市农业科学研究院，山东烟台 nbsp;265500；2山东农业大学园艺科学与工程学院 /作物生物学国家重点实验室，山东泰安 nbsp;271018） nbsp;摘 nbsp;要 为了研究水平叶幕和直立叶幕所构成的微域环境对套袋葡萄果实花色苷代谢的影响，分别以棚架、篱架代表水平叶幕和直立叶幕，连续两年对棚架和篱架的‘摩尔多瓦’葡萄进行套袋，于果实膨大期开始实时监控果穗袋内微环境的温度和湿度；从转色期至果实成熟，测定不同发育阶段浆果果皮花色苷单体组分与含量，以及果皮花色苷代谢途径相关基因表达量与酶活性，分析果实品质差异。结果表明， 2015 年、 2016 年棚架水平叶幕下套袋果实袋内的高温极值及高温比例和湿度波动幅度与篱架直立叶幕套袋相比均有明显降低；连续两年成熟果实还原糖含量分别比篱架套袋的高 18.33和 15.41，且棚架的果实酸度较低； 2015 年测定棚架套袋果实的单宁及花色苷含量分别比篱架套袋的提高 22.32和35.29，果实果皮红色度显著提高，而 2016 年夏季较冷凉，棚架套袋果实的总酚、黄烷醇、类黄酮含量分别比篱架套袋降低 10.72、 10.97和 45.04。 2015 年花后 77 d，棚架套袋果实的花色苷单体含量较高，但到花后 91 d 时，篱架套袋果实花色苷单体含量补偿性增加。成熟果实果皮中均检测到 21 种花色苷单体，棚架套袋葡萄花色苷双糖苷化、甲基化及总修饰度均高于篱架套袋果实，但有 19 种花色苷单体含量低于篱架套袋果实。花后 63 105 d，除 VvOMT 外，棚架与篱架套袋葡萄花色苷代谢途径中 VvUFGT、VvLDOX、 Vv5GT 和 VvPPO 基因表达变化趋势一致，但相关酶活性差异较大。由此可见，水平叶幕可降低果实微域环境的温湿度，增加套袋果实品质及花色苷单体修饰程度，但降低花色苷单体含量，并影响花色苷代谢途径中相关酶基因的表达量及活性。 nbsp;关键词 葡萄；叶幕类型；套袋；花色苷 nbsp;中图分类号 S 663.1 nbsp; nbsp; nbsp; 文献标志码 A nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;文章编号 0513-353X（ 2018） 03-0457-14 Difference of Bagged‘ Moldova’ Grapes’ Anthocyanin Metabolism for Two Trellis Systems LIU Xiaohong1,2， XIAO Qiuhong2， SUN Yongjiang2， DU Yuanpeng2， and ZHAI Heng2,*（1Yantai Academy of Agricultural Sciences， Yantai， Shandong 265500， China；2College of Horticulture and engineering，Shandong Agricultural University， State Key Laboratory of Crop Biology， Tai’an， Shandong 271000， China） nbsp;Abstract In order to study the effect of bagging on anthocyanin metabolism in different micro- environment from different canopy types， we bagged the‘ Moldova’ grape of pergola and vertical trellis Liu Xiaohong， Xiao Qiuhong， Sun Yongjiang， Du Yuanpeng， Zhai Heng. Difference of bagged‘ Moldova’ grapes’ anthocyanin metabolism for two trellis systems. 458 nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;Acta Horticulturae Sinica， 2018， 45 3 457– 470. system to represent the horizontal and vertical canopy. Temperature and relative humidity around the clusters of the two canopy types were recorded from berry expansion stage. Grape berries were picked from veraison to maturity stage to determine the component and content of individual anthocyanin in fruit skin by HPLC–MS； additionally， the enzymes activity and their gene relative expression were measured， and the grape quality of different canopy types were compared. The results showed that horizontal canopy decreased the ratio of high temperature and humidity fluctuation around the cluster compared to the vertical canopy in 2015 and 2016. The content of reducing sugar was increased by 18.33 and 15.41 and the acid was decreased compared to the vertical canopy for two consecutive years. In 2015， the content of tannin and anthocyanin of bagged fruit under horizontal canopy was increased by 22.32 and 35.29 compared to the vertical canopy，and the red chrom of fruit skin increased apparently； in contrast， the content of total phenols， flavanols and flavonoids decreased by 10.72， 10.97 and 45.04， respectively， in 2016. At 77 days after blossom，the bagged fruit under pergola showed a higher content of individual anthocyanin； however， the bagged fruit of vertical trellis systems showed compensatory increase at 91 days after blossom. Analysis of individual anthocyanin indicated that they both have 21 individual anthocyanin and the diglucosidation，methylation and total modification of bagged fruit under pergola were higher than under vertical trellis system. From 63 to 105 days， the relative expression of the genes VvUFGT， VvLDOX， Vv5GT， VvPPO in anthocyanin metabolic pathway showed the same trend except VvOMT， but their enzyme activities showed difference. Thus it can be seen， the horizontal canopy can decrease the temperature and humidity of the micro-environment around grape， increase the quality of fruit and the degree of modification of individual anthocyanin， but the content of individual anthocyanin was decreased， at the same time， the relative expression and the activity of enzyme were changed. Keywords grape； canopy type； bagging； anthocyanin 篱架和棚架栽培是葡萄生产中所采用的两种主要方式，篱架栽培主要应用于酿酒葡萄及部分鲜食葡萄，棚架栽培则主要应用于鲜食葡萄。不同架式构成的叶幕类型不同，形成的微气候也有很大区别。篱架以直立叶幕为主，群体叶幕光照充足，比较通风透光，但叶片和果实受气候变化的影响较大（ Pool et al.， 1993； Clingeleffer， 2016） 。高温强光会抑制叶片的光合作用（史祥宾 nbsp;等， 2016） ，造成日灼或气灼，直接影响碳水化合物的形成，减少果实次生代谢的底物，进而影响花色苷、多酚等与葡萄色泽、风味有关的物质水平。 Spayd 等（ 2002）的研究表明，直接曝光的果实表面温度比周边及遮荫的果实高 13 ℃，这必然加强呼吸作用，过强的呼吸作用会导致果实糖酸含量下降（孙艳和徐伟君， 2007） ，长期高温甚至会使得已经上色的果实发生褪色，造成果实品质下降。棚架水平叶幕的果实和部分叶片处于遮荫状态。有研究表明棚架对光能的利用率高，可以增强植株的光合速率，促进碳水化合物的累积，进而增加果实产量（陈建红 nbsp;等， 2009） 。 Bergqvist 等（ 2001）研究发现，合理的叶幕类型可有效降低果实表面温度，使花色苷等重要次生代谢物质含量达到最优水平。 nbsp;花色苷是葡萄与葡萄酒的主要呈色物质，是果实成熟度的主要评价标准之一，影响着葡萄及葡萄酒的色泽、风味及营养价值（孙明霞 nbsp;等， 2003）和商品价值（ Carreno et al.， 1995； Cooper-Driver，2001； Liang et al.， 2008） 。本实验室前期研究表明，棚架水平叶幕下果实周边微气候相对稳定，架面外部光照充足，有利于果实次生代谢物质的积累，可增加花色苷单体含量（刘笑宏 nbsp;等， 2016） 。套袋作为果树安全生产的一项技术措施，不但隔绝了农药污染，明显减少病虫、鸟害，也阻挡了光刘笑宏，肖秋红，孙永江，杜远鹏，翟 nbsp; 衡 . 两种叶幕类型‘摩尔多瓦’葡萄套袋果实花色苷代谢的差异 . 园艺学报， 2018， 45 3 457– 470. nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 459 的直射，对减少日灼病、黑痘病等有显著效果，并可使果面清洁，着色均匀，增进果实色泽（楚燕杰， 1999） ，然而套袋也会使果实周围形成高温高湿的微环境（谌有光 nbsp;等， 2000） ，这种影响是否会因架式 /叶幕类型的不同而有所差异尚无报道。本试验中以‘摩尔多瓦’葡萄为试材，探讨了棚架和篱架两种架式叶幕类型条件对套袋葡萄果实花色苷代谢的影响， 以期增进对葡萄花色苷代谢的了解。 nbsp;1 nbsp;材料与方法 nbsp;1.1 nbsp;试验材料与处理 nbsp;试验于 2015 2016 年在山东农业大学葡萄示范园进行。地址位于东经 117.0北纬 36.7，属暖温带半湿润性季风气候，年平均气温为 12.9 ℃， 10 ℃以上积温 4 213 ℃，年降水量约 700 mm，年平均日照数 2 627 h。 nbsp;2014 年以田间 4 年生鲜食与酿酒兼用葡萄品种 ‘摩尔多瓦’ （ Moldova Guzal Kala Villard blanc）为试材，设龙干形棚架水平叶幕（ Vertical Trellis System， VTS） 、单干单臂形篱架直立叶幕（ Pergola，PG）两个处理，均为南北行向，行距 2.2 m，高 2.0 m，棚架株距 1.7 m，篱架株距 1.2 m。两种架式均种植两行，各 36 株， 2 芽短枝修剪，每 20 cm 留一结果母枝，每个结果枝留 2 个果穗，豆果期疏去副穗和穗尖，生长期内修剪及肥水管理一致。 2015 年 7 月初用葡萄专用白色纸袋进行套袋，套袋时将温度监测仪探头封入袋内进行实时监控， 2016 年增设湿度监测。 nbsp;每个处理分为 4 个小区（每小区 9 株） ，自 7 月 27 日转色期（落花后 63 77 d）至 9 月 17 日成熟期（落花后 105 d）每 14 d 采样 1 次，共 4 次。每次每小区随机采集 4 个果穗（带袋采摘） ，其中篱架直立叶幕为东西两侧交叉采样，取靠近中间部位新梢上的果穗。采后立即带回实验室取下果粒，同一小区分别混匀。每小区取 5 粒浆果剥皮后，果皮单独成包，每个时期每个处理至少 15 包，液氮冷冻后存于– 80 ℃，供花色苷代谢途径相关基因表达量、酶活性及花色苷单体测定；另保留部分剪取的果实鲜样测定果实品质，其余果实置于– 40 ℃冰箱，供果实品质相关指标测定（测定时去除种子，仅使用果皮及果肉） 。 2016 年试验设计与 2015 年相同。 nbsp;1.2 nbsp;测定方法 nbsp;通过温度记录仪统计 nbsp;≥ nbsp;35 ℃高温数据个数，将其与该月总数据个数相比得到该月高温比例；检索湿度记录仪 60 80及 nbsp;≥ nbsp;90以上的湿度数据个数，与该月总数据个数相比得到该湿度比例。 nbsp;取 5 粒浆果，挤汁离心后用 pH 计（ Sartorius PB-10）测定果汁 pH；酸碱滴定法测定可滴定酸含量（郭新光 nbsp;等， 2006） ；使用便携式测色仪（ Chroma Meter CR-400）测定单粒果实色度（ L*黑白偏差量； a*红绿偏差量； b*黄蓝偏差量； C*色彩饱和度） ，重复 30 次，并以篱架直立叶幕果实为对照，计算棚架水平叶幕与篱架直立叶幕果实的色差值 dE， dE 为 0.5 1.0 时表示色差微小；1.0 2.0 表示色差中等； 2.0 4.0 表示色差较大。取– 40 ℃保存的样品，用 3,5–二硝基水杨酸法测定还原糖含量（赵世杰 nbsp;等， 1998） ； Folin-Cioealetu 法测定果实总酚含量（刘芸 nbsp;等， 2011） ；亚硝酸盐氯化铝法测定类黄酮含量（ Kim et al.， 1999） ；香草醛盐酸法测定黄烷醇含量（ Waterhouse et al.， 2000） ； Folir-Denis 法测定果实单宁含量（耿娜娜 nbsp;等， 2013） ； pH 示差法测定果皮花色苷含量（ Orak， 2007） 。所有指标均按田间重复进行测定，每个样品平行测定 3 次。 nbsp;取– 80 ℃保存的样品，参照成果（ 2015）的方法测定花色苷代谢途径中的合成基因 VvUFGT 与VvLDOX、修饰基因 Vv5GT 与 VvOMT，以及降解基因 VvPPO 的相对表达量；参照曹鹏（ 2004）的Liu Xiaohong， Xiao Qiuhong， Sun Yongjiang， Du Yuanpeng， Zhai Heng. Difference of bagged‘ Moldova’ grapes’ anthocyanin metabolism for two trellis systems. 460 nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;Acta Horticulturae Sinica， 2018， 45 3 457– 470. 图 2 nbsp;叶幕类型对套袋葡萄微域环境湿度的影响 nbsp;Fig. 2 nbsp;Effect of canopy type on the humidity of bagged grape’s microenvironment 方法 （略有改动） 采用酶联免疫分析测定相关酶活性 （ Enzyme-linked Immunosorbent Assay， ELISA） 。 nbsp;花色苷单体的测定采用高效液相色谱质谱联用（ HPLC– MS）技术，色谱条件参考刘笑宏等（ 2017）的报道。标准物质为二甲花翠素– 3– O 葡萄糖苷（ Malvidin-3-O glucoside， Mv） 。做 Mv的外标定量，浓度梯度为 31.25、 62.5、 125、 250、 500、 750 和 1 000 mg L-1， 7 个水平，其他花色苷以相当于 Mv 含量计。基于葡萄与葡萄酒花色苷 HPLC– UV– MS/MS 指纹谱库（程国利， 2007；何建军， 2010）进行花色苷定性；利用质谱全离子扫描图谱，通过对样品质谱分析、保留时间及文献报道（孙文娟， 2015）比对分析，确定单体花色苷的种类。质谱结果用 Mass Lynx V4.1（ Waters）分析软件进行分析，物质结构的鉴定参考标准物质及 Lopes-da-Silva 等（ 2002）的方法。 nbsp;2 nbsp;结果与分析 nbsp;2.1 nbsp;叶幕类型对套袋果实微环境温湿度的影响 nbsp;连续两年对两种叶幕类型套袋果穗内的温度监测显示，棚架水平叶幕的温度波动及日平均气温均小于篱架直立叶幕（图 1） 。 2015 年，篱架直立叶幕袋内高温极值达到 44.2 ℃，棚架水平叶幕袋内为 39.2 ℃，篱架直立叶幕袋内 nbsp;≥ nbsp;35 ℃的高温占 7.71，是棚架水平叶幕的 2.59 倍。 2016 年夏季比较冷凉，棚架水平叶幕和篱架直立叶幕袋内 35 ℃以上高温分别占 4.65和 6.24，且两个处理的温度差异主要表现在 8 月下旬至 9 月。 nbsp;图 1 nbsp;叶幕类型对套袋葡萄微域环境温度的影响 nbsp;Fig. 1 nbsp;Effect of canopy type on the temperature of bagged grape’s microenvironment 2016 年测定两种叶幕类型套袋袋内的湿度数据，如图 2 所示，篱架套袋的袋内湿度波动大，日平均湿度高。 nbsp;篱架套袋微域环境湿度在 60 80范围的比例为 17.11，比棚架套袋低 18.91；而易引发病害的高湿（ ≥ nbsp;90）比例为 54.28，比棚架套袋高 24.18， 说明篱架套袋受降雨和日照的影响大。 nbsp;刘笑宏，肖秋红，孙永江，杜远鹏，翟 nbsp; 衡 . 两种叶幕类型‘摩尔多瓦’葡萄套袋果实花色苷代谢的差异 . 园艺学报， 2018， 45 3 457– 470. nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 461 2.2 nbsp;叶幕类型对套袋果实品质的影响 nbsp;2.2.1 nbsp;糖酸含量 nbsp;连续两年测定均显示，从果实膨大到转色时，两种叶幕类型套袋葡萄的还原糖含量无显著差异（表 1） ，至果实成熟时，棚架套袋果实比篱架套袋 2015 年和 2016 年分别提高 18.33和 15.41。葡萄可滴定酸的含量变化两年份表现不同， 2015 年，棚架套袋果实可滴定酸含量前期显著高于篱架套袋果实，但在花后 105 d 时比篱架套袋显著降低 7.93；而 2016 年的整个测定期内两种处理的差异并不显著。 nbsp;表 1 nbsp;叶幕类型对套袋果实糖酸含量的影响 Table 1 nbsp;Effect of canopy type on the reducing sugar and titratable acid content of bagged grape nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; g L-1年份 nbsp;Year 处理 nbsp;Treatment 还原糖 nbsp;Reducing sugar 可滴定酸 nbsp;Titratable acid content 63 d 77 d 91 d 105 d 63 d 77 d 91 d 105 d 2015 棚架 nbsp;Pergola 78.48 a 86.61 a 165.87 a 185.74 a 20.41 a 7.60 b 6.39 a 5.69 b 篱架 nbsp;Vertical trellis system 73.77 a 82.78 a 164.21 a 156.96 b 16.79 b 8.74 a 6.26 b 6.18 a 2016 棚架 nbsp;Pergola 3.08 a 63.95 a 96.82 a 122.06 a 29.21 a 13.02 a 9.38 a 6.58 a 篱架 Vertical trellis system 3.25 a 70.35 a 91.04 b 105.76 b 27.25 a 13.29 a 9.49 a 6.77 a 2.2.2 nbsp;酚类物质含量 nbsp;2015 年两种叶幕类型套袋果实总酚、类黄酮、黄烷醇含量差异并不显著（表 2） ，但棚架套袋葡萄的单宁、花色苷含量分别比篱架套袋显著提高 22.32、 35.29。而 2016 年夏季冷凉，结果有所不同， 棚架套袋葡萄的总酚、 黄烷醇、 类黄酮含量分别比篱架套袋显著降低 10.72、 10.97、 45.04，但两者的单宁、花色苷含量差异不显著。 nbsp;表 2 nbsp;叶幕类型对套袋果实次生代谢物质含量的影响 nbsp;Table 2 nbsp;Effect of canopy type on the metabolism content of bagged grape nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; mg g-1年份 nbsp;Year 处理 nbsp;Treatment 总酚 nbsp;Total phenol 类黄酮 nbsp;Flavonoids 黄烷醇 nbsp;Flavanols 单宁 nbsp;Tannin 花色苷 nbsp;Anthocyanin2015 棚架 nbsp;Pergola nbsp;2.83 a 0.93 a 0.39 a 1.37 a 0.69 a 篱架 Vertical trellis system nbsp;2.53 a 0.81 a 0.39 a 1.12 b 0.51 b 2016 棚架 nbsp;Pergola nbsp;6.33 a 3.41 a 1.33 a 2.02 a 1.32 a 篱架 Vertical trellis system 7.09 b 3.83 b 2.42 b 2.02 a 1.50 a 2.2.3 nbsp;果实色泽 nbsp;2015 年棚架套袋成熟果实比篱架套袋果实亮度（ L*）显著降低、红色度（ a*）显著增加；同时，棚架套袋果实的（ b*）为正值，表示果实偏黄，而篱架套袋果实的 b*为负值，表示果实偏蓝，色彩饱和度（ C*）差异不显著。 2016 年棚架套袋成熟果实红色度（ a*）比篱架套袋的显著降低，但亮度（ L*） 、色彩饱和度（ C*）差异不显著。两种叶幕类型下果实色差（ dE）两年均达到中等水平（表 3） 。 nbsp;表 3 nbsp;叶幕类型对套袋摩尔多瓦成熟果实色泽的影响 nbsp;Table 3 nbsp;Effect of canopy type on the bagged Moldova grape fruit’s color in maturity 年份 nbsp;Year 处理 nbsp;Treatment CIE L*a*b*C*dE 2015 nbsp;棚架 nbsp;Pergola nbsp;22.65 b 3.31 a 1.16 a 3.81 a 1.64 篱架 Vertical trellis system nbsp;23.30 a 2.96 b – 0.30 a 4.83 a 2016 nbsp;棚架 nbsp;Pergola nbsp;23.08 a 3.42 b 0.77 a 3.68 a 1.03 篱架 Vertical trellis system 23.27 a 4.43 a 0.77 a 4.40 a nbsp;Liu Xiaohong， Xiao Qiuhong， Sun Yongjiang， Du Yuanpeng， Zhai Heng. Difference of bagged‘ Moldova’ grapes’ anthocyanin metabolism for two trellis systems. 462 nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;Acta Horticulturae Sinica， 2018， 45 3 457– 470. 2.3 nbsp;叶幕类型对套袋果实花色苷代谢途径相关酶的影响 nbsp;不同叶幕类型明显影响了果实发育过程中花色苷途径相关酶的活性（图 3） 。与篱架套袋果实相比，转色初期（花后 63 d） ，棚架套袋果实花色苷合成酶 LDOX、修饰酶 OMT 活性较高，但 UFGT、5GT 活性较低，花色苷氧化酶 PPO 活性亦较高。花后 77 d，棚架套袋果实 UFGT、 OMT 的酶活性均显著提高， 5GT 活性下降较大，篱架套袋果实 LDOX、 OMT 活性亦提升较大，但两种叶幕类型的 PPO 活性在这一时期均呈下降趋势；花后 91 105 d，篱架套袋果实除 PPO 和 UFGT 外各种酶的活性均呈下降趋势，而棚架套袋果实中的各种酶活均上升。 nbsp;图 3 nbsp;不同叶幕类型下的套袋葡萄花色苷代谢途径相关酶活性分析 nbsp;Fig. 3 nbsp;Analysis of bagged grape’s enzyme activity in anthocyanin pathway of different canopy types 不同叶幕类型对套袋葡萄花色苷代谢途径相关基因的时空表达影响不同，两种叶幕类型果实果皮的 VvUFGT 表达量从果实转色至成熟，变化趋势均较为一致， VvLDOX、 Vv5GT、 VvPPO 在花后77 d 之后变化趋势一致 （同时呈现下降或上升状态） ， 但 VvOMT 的表达量在整个过程中差异较大 （图4） 。棚架套袋葡萄果皮花色苷修饰基因 Vv5GT、 VvOMT 的表达量分别在花后 63 d、 77 d 显著高于篱架套袋果实，但合成基因 VvLDOX 则在整个测定过程中均低于篱架套袋果实；花后 91 105 d，棚刘笑宏，肖秋红，孙永江，杜远鹏，翟 nbsp; 衡 . 两种叶幕类型‘摩尔多瓦’葡萄套袋果实花色苷代谢的差异 . 园艺学报， 2018， 45 3 457– 470. nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 463 架套袋果实的 VvUFGT、 VvPPO 表达量高于篱架套袋果实，但 VvLDOX、 VvOMT、 Vv5GT 均低于篱架套袋果实。 nbsp;将花色苷代谢途径相关酶的活性与其基因表达量变化趋势相比较发现，两种叶幕类型套袋果实的 OMT 在整个测定期内趋势一致，篱架套袋、棚架套袋的 LDOX 分别在花后 63 91 d、 77 105 d趋势一致。 nbsp;图 4 nbsp;不同叶幕类型下的套袋葡萄花色苷代谢途径相关酶的基因表达量分析 nbsp;Fig. 4 nbsp;Analysis of bagged grape’s gene expression in anthocyanin pathway of different canopy types 2.4 nbsp;叶幕类型对套袋果实花色苷单体的影响 nbsp;2.4.1 nbsp;花色苷单体组分及含量 nbsp;果实着色过程中，不同叶幕类型套袋葡萄花色苷单体的组成和积累速度有明显不同（表 4） ，两个处理均在花后 63 77 d 呈现花色苷单体骤升现象，篱架套袋果实上升幅度更大，但花色苷单体种类相对较少，而棚架套袋果实花色苷升幅较缓，单体种类相对较多。 nbsp;Liu Xiaohong， Xiao Qiuhong， Sun Yongjiang， Du Yuanpeng， Zhai Heng. Difference of bagged‘ Moldova’ grapes’ anthocyanin metabolism for two trellis systems. 464 nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;Acta Horticulturae Sinica， 2018， 45 3 457– 470. 表 4 nbsp;不同叶幕套袋葡萄花色苷单体组分及含量分析 nbsp;Table 4 nbsp;Analysis of anthocyanin component and content of bagged grape in different canopy types 保留时间 / min Retention time 分子离子碎片 nbsp;Molecular and nbsp;ion fragments 化合物 nbsp;Component 含量 /（ mg kg-1） Content 63 d nbsp;77 d nbsp;PG VTS PG VTS 1.56 627465,303 花翠素– 3,5– O–双葡萄糖苷 nbsp;Dephinidin-3,5-O-diglucoside 84.74 a 26.55 b 3.16 641479,317 甲基花翠素– 3,5– O–双葡萄糖苷 nbsp; Petunidin-3,5-O-diglucoside 10.10 b 20.68 a 294.27 a 102.10 b 3.33 465303 花翠素– 3– O–葡萄糖苷 nbsp;Dephinidin-3-O-glucoside 12.63 152.70 a 62.66 b 4.96 625463,301 甲基花青素– 3,5– O–双葡萄糖苷 nbsp; Peonidin-3,5-O-diglucoside 47.36 a 66.80 a 359.47 a 210.66 b 5.08 655493,331 二甲花翠素– 3,5– O–双葡萄糖苷 nbsp; Malvidin-3,5-O-diglucoside 390.29 b 628.23 a 1 925.77 a 1 588.82 b6.07 479317 甲基花翠素– 3– O–葡萄糖苷 nbsp;Petunidin-3-O-glucoside 19.76 a 23.67 a 217.33 a 97.16 b 8.22 463301 甲基花青素– 3– O– 葡萄糖苷 nbsp;Peonidin-3-O-glucoside 7.57 a 7.69 a 30.11a 14.47 b 9.31 493331 二甲花翠素– 3– O–葡萄糖苷 nbsp;Malvidin-3-O-glucoside 121.65 a 129.13 a 655.94 a 370.05 b 11.04 697535,493,331 花翠素– 3– O– 6– O–乙酰 葡萄糖苷 nbsp; Dephinidin-3-O-6-O-acetyl-glucoside 240.56 a 135.57 b 13.75 773611,465,303 花翠素– 3– O– 6– O–香豆酰 葡萄糖苷– 5– O–葡萄糖 nbsp;苷 nbsp;Dephinidin-3-O-6-O-coumaryl-5-O-diglucoside 76.46 a 23.90 b 15.26 521317 甲基花翠素– 3– O– 6– O–乙酰 葡萄糖苷 nbsp;Petunidin-3-O-6-O-acetyl- glucoside 16.96 787625,479,317 甲基花翠素– 3– O– 6– O– 香豆酰 葡萄糖苷– 5– O–葡 nbsp;萄糖苷 nbsp;Petunidin-3-O-6-O-coumaryl-5-O-diglucoside 167.54 a 50.93 b 18.01 801639,493,331 顺式二甲花翠素– 3– O– 6– O–香豆酰 葡萄糖苷– 5– O– nbsp;葡萄糖苷 nbsp;Malvidin-3-O-cis-6-O-coumaryl-5-O-Diglucoside 14.70 59.78 a 21.60 b 18.17 611303 花翠素– 3– O– 6– O–香豆酰 葡萄糖苷 nbsp;Dephinidin-3-O-6-O-coumaryl-glucoside 13.32 212.96 a 83.47 b 18.24 535331 二甲花翠素– 3– O– 6– O–乙酰 葡萄糖苷 nbsp;Malvidin-3-O-6-O-acetyl-glucoside 66.91 a 42.76 b 19.62 801639,493,331 反式二甲花翠素– 3– O– 6– O–香豆酰 葡萄糖苷– 5– O– nbsp;葡萄糖苷 nbsp;Malvidin-3-O-trans-6-O-coumaryl-5-O-diglucoside 37.47 b 97.73 a 1 240.37 a 698.84 b 21.01 595287 花青素– 3– O– 6– O–香豆酰 葡萄糖苷 nbsp;Cyanidin-3-O- 6-O-coumaryl-glucoside 21.75 625317 甲基花翠素– 3– O– 6– O–香豆酰 葡萄糖苷 nbsp; Petunidin- 3-O-6-O-coumaryl-glucoside 11.71 b 27.24 a 334.86 a 152.13 b 22.88 639331 顺式二甲花翠素– 3– O– 6– O– 香豆酰 葡萄糖苷 nbsp;Malvidin-3-O-cis-6-O-coumaryl-glucoside 14.82 24.0/p