北京地区南瓜病毒病病原种类鉴定.pdf

pMolecular Identification of Tomato mottle mosaic virus nbsp;CHEN Ling-zhi 1，ZHANG Ru 1，WEI Bing-qiang 1 ，WANG Lan-lan 1 ，GAO Yan-ping 2 ，ZHANG Wu 2 〔 1 Institute nbsp;of nbsp;Vegetables，Gansu nbsp;Academy nbsp;of nbsp;Agricultural nbsp;Sciences，Lanzhou nbsp;730070，Gansu，China； 2 Gansu nbsp;Potato nbsp;Seed （Seedling）Virus nbsp;Detection nbsp;and nbsp;uation nbsp;of nbsp;Engineering nbsp;Technology nbsp;Research nbsp;Center，Lanzhou nbsp;730070，Gansu， nbsp;China〕 Abstract nbsp;Using nbsp;DAS-ELISA nbsp;and nbsp;RT-PCR nbsp;s，this nbsp;study nbsp;identified nbsp;pepper nbsp;pathogenetic nbsp;virus nbsp;in nbsp;experimental nbsp;fields nbsp;of nbsp;Vegetable nbsp;Insititute，Gansu nbsp;Academy nbsp;of nbsp;Agricultural nbsp;Sciences. nbsp;The nbsp;results nbsp;showed nbsp;that nbsp;in nbsp;72 nbsp;disease nbsp;infected nbsp;samples，the nbsp;total nbsp;TMV nbsp;detection nbsp;rate nbsp;was nbsp;66.7，whereas nbsp; CMV nbsp;had nbsp;not nbsp;been nbsp;detected nbsp;as nbsp;positive. nbsp;Three nbsp;pairs nbsp;of nbsp;primers nbsp;were nbsp;designed nbsp;to nbsp;amplify nbsp;positive nbsp;samples. nbsp;A nbsp;strip nbsp;with nbsp;similar nbsp;segments nbsp;was nbsp;amplified nbsp;only nbsp;from nbsp;primer nbsp;TMV1，which nbsp;had nbsp;97 nbsp;sequence nbsp;similarity nbsp;with nbsp;ToMMV nbsp;by nbsp;BLASTN nbsp;comparison. nbsp; Aiming nbsp;at nbsp;ToMMV，3 nbsp;pairs nbsp;of nbsp;primers nbsp;ToMMV1，ToMMVcp nbsp;and nbsp;ToMMVspe nbsp;were nbsp;designed nbsp;to nbsp;amplify nbsp;ToMMV. nbsp; A nbsp;single nbsp;target nbsp;band nbsp;with nbsp;same nbsp;size nbsp;as nbsp;expected nbsp;was nbsp;amplified. nbsp;Its nbsp;sequence nbsp;was nbsp;98 nbsp;accorded nbsp;with nbsp;ToMMV nbsp;by nbsp;sequencing，proving the virus found in the experimental fields of Vegetable Insititute was truly ToMMV. Key wordsPepper；Virus disease；DAS-ELISA；ToMMV；RT-PCR 北京地区南瓜病毒病病原种类鉴定 陈利达 曹金强 石延霞 柴阿丽 谢学文 *李宝聚 *（中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京 100081） 摘 要为明确北京地区南瓜病毒病种类及其主要侵染病原，2016～2017年在北京周边采集疑似感染病毒的南瓜病样84份， 并根据南瓜上的6种病毒特异性引物对其进行反转录PCR（RT-PCR）检测。结果表明共有79份南瓜病样检测显示阳性， 其中黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus ，CMV）的检出率最高，为52.38；其次是小西葫芦黄花叶病毒（ Zucchini yellow nbsp;mosaic virus，ZYMV）和西瓜花叶病毒（Watermelon mosaic virus ，WMV），检出率分别为44.01、14.29，其他病毒暂未检出。 此外，16.67的样品受2种病毒复合侵染，CMV和ZYMV复合侵染占7.14，ZYMV和WMV复合侵染占9.52。北京地区 南瓜上优势病毒种类为CMV，且存在病毒复合侵染现象。 关键词南瓜；病毒病；种类鉴定 ficifolia nbsp;Bouch）并列为世界上南瓜属作物的5个 栽培种（李昕升 nbsp;等，2017） 。南瓜因产量高、效益 好，且具有一定的保健作用，成为我国北方地区菜 粮兼用作物之一。据联合国粮农组织（FAO）统计， 2014年全世界南瓜产量约为2 nbsp;519万t，我国占世 界当年总产量的28.74 nbsp; ，居世界第1位（王璐， 2017） 。随着南瓜种植规模的扩大，病毒病也愈发 严重，成为制约南瓜产业发展的主要因素之一，尤 其在高温干旱的年份，严重影响南瓜的品质与产 量。据报道，能够侵染南瓜的病毒种类有80多种， 其中小西葫芦黄花叶病毒（Zucchini yellow mosaic nbsp;陈利达，男，硕士，科研助理，专业方向蔬菜病害检测，E-mail nbsp; *通讯作者（Corresponding nbsp;authors） 谢学文，男，博士，专业方向蔬 菜病害综合防治，E-；李宝聚，男，研究员， 专业方向蔬菜病害综合防治，E-mailL 收稿日期2017-12-04；接受日期2018-03-06 基金项目国家重点研发计划项目（2016YFD0201010），公益性行业（农 业）科研专项经费课题项目（201303112） 南瓜（Cucurbita moschata nbsp;Duch.，中国南瓜）、 笋瓜（Cucurbita maxima nbsp;Duch. ex Lam.，印度南瓜）、 西葫芦（Cucurbita pepo nbsp;L.，美洲南瓜） 、墨西哥南 瓜（ Cucurbita mixta Pangalo）和黑籽南瓜（ Cucurbita nbsp; nbsp;43 nbsp; 新优品种 栽培管理 本期视点 产业市场 病虫防控 nbsp;43 nbsp; 研究论文 中 国 蔬 菜 nbsp; nbsp; CHINA VEGETABLES 2018（6）43 - 47 virus，ZYMV）、黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic nbsp;virus，CMV） 、西瓜花叶病毒（Watermelon mosaic nbsp;virus，WMV） 、南瓜花叶病毒（ Squash mosaic nbsp;virus，SqMV） 、番木瓜环斑病毒（Papaya ringspot nbsp;virus，PRSV）和马铃薯Y病毒（Potato viurs nbsp;Y， PVY）（Lecoq nbsp;et nbsp;al.，1997；Fletcher nbsp;et nbsp;al.，2000；周 贤，2013；刘嘉峪 等，2017）发生相对普遍。 近年来北京地区南瓜的种植面积逐年增加，南 瓜病毒病危害日趋严重，本文针对北京周边地区采 集的疑似感染病毒病的南瓜叶片，采用反转录PCR （RT-PCR）技术进行检测，以期了解北京地区南 瓜上主要病毒种类及其分布，为当地南瓜病毒病的 防控和抗病品种的选育提供参考。 1 材料与方法 1.1 样品采集 2016～2017年，在北京周边地区采集疑似感 染病毒病的南瓜样本（叶片）共84份顺义区32 份、昌平区15份、大兴区12份、海淀区25份。 所采样品均保存在-80 ℃冰箱备用。 1.2 试剂与仪器 试剂TRIzol nbsp;Reagent购自英潍捷基（上海） 贸易有限公司；反转录试剂盒FastQuant nbsp;RT nbsp;Kit 购自天根生物科技（北京）有限公司；2 Taq nbsp;Mix（MT201）购自博迈德科技（北京）有限公司。 仪器设备3K15型高速离心机，德国Sigma 公司生产；DYY-6C型电泳仪，北京市六一仪器厂 生产；移液枪，德国Eppendorf公司生产；Jel nbsp;Doc nbsp;2001型凝胶成像系统、Bio-Rad nbsp;S1000 nbsp;PCR仪，美 国伯乐公司生产。 1.3 植物总 RNA提取 采用TRIzol法提取南瓜叶片总RNA。取100 nbsp;mg南瓜叶片于液氮中研磨，将0.2 nbsp; g粉末转入1.5 nbsp; mL离心管，迅速加入1 mL TRIzol试剂，振荡混匀， 室温下静置5 nbsp;min；4 nbsp;℃下12 nbsp;000 nbsp;rmin -1 离心10 nbsp;min；将上清液转入1.5 nbsp;mL离心管，加入0.2 nbsp;mL氯 仿混匀，室温放置5 nbsp;min；4 nbsp;℃下12 nbsp;000 nbsp;rmin -1 离 心10 nbsp;min；取水相（约400 nbsp;μL）加入等体积的异 丙醇，室温下静置10 nbsp;min；4 nbsp;℃下12 nbsp;000 nbsp;rmin -1 离心10 nbsp;min；弃上清液，加入1 nbsp;mL nbsp;75乙醇洗涤 沉淀2次，4 nbsp;℃下12 nbsp;000 nbsp;rmin -1 离心5 nbsp;min；自然 干燥，加入50 nbsp;μL nbsp;RNase-Free nbsp;ddH 2 O溶解；以健 康南瓜叶片总RNA为阴性对照，-80 ℃保存备用。 1.4 南瓜病毒病样本 RT-PCR检测 以提取总RNA为模板，用FastQuant nbsp;RT nbsp;Kit试 剂盒反转录合成病毒的cDNA第一条链。使用已报 道的CMV-F/CMV-R、SqMV-1/SqMV-2、PRSV-F/ PRSV-R和PVY-1/PVY-2特异性引物（表1）对 不同样本进行RT-PCR扩增，其中ZYMV-1/2和 WMV-1/2是根据GenBank已有的病毒外壳蛋白基 因（Coat Protein，CP）序列所设计。所用引物均 由博迈德科技（北京）有限公司合成。 表1 用于南瓜病毒病分子检测的引物信息 引物编号引物序列（5′-3′） PCR产物/bp参考文献 CMV-F CGTTTAGTGACTTCA GACAG 735 nbsp;宋婷婷 nbsp;CMV-R ATG GACAAATCTGAATCAAC 等，2007 ZYMV-1 AAAGAAGAAGACAAAGGGAA 582 自行设计 ZYMV-2 AGCGTATCGTGCTAAACT WMV-1 ACACCAGTGGCAAAGGG 697 nbsp;自行设计 WMV-2 CCATCAAGTCCAAATAACC SqMV-1 CATGGTACAGCAGCTTGGAAC 597 nbsp;廖富荣 nbsp;SqMV-2 GAAGCCACAACAAAACCCAGA 等，2013 PRSV-F ATGAGGCTGTGGATGCTGGTTTA 325 nbsp;任春梅 nbsp;PRSV-R GATTGAGTGGCACGAGTATTAGA 等，2015 PVY-1 GCCAACTGTGATGAATGGGC 400 nbsp;冯光惠 nbsp;PVY-2 TGTACTGATGCCACCGTCCA 等，2014 PCR扩 增 体 系2Taq nbsp;PCR nbsp;Master nbsp;Mix nbsp;10 nbsp;μL，上下游引物各 nbsp;0.5 nbsp;μL，cDNA模板 nbsp;1 nbsp;μL， ddH 2 O补足至20 nbsp;μL。PCR扩增条件94 nbsp;℃预变 性4 nbsp;min；94 nbsp;℃变性30 nbsp;s，53 nbsp;℃退火30 nbsp;s，72 nbsp;℃延 伸45 nbsp;s，共34个循环；72 nbsp;℃补充延伸10 nbsp;min。扩 增结束后，取5 nbsp;μL nbsp;PCR产物于1.5琼脂糖凝胶 电泳检测，使用全自动凝胶成像系统记录结果。 PCR产物送至博迈德科技（北京）有限公司进行 测序，并利用NCBI序列比对工具BLAST（http// blast.ncbi.nlm.nih.gov/）程序，根据核酸序列同源性 确定病毒种类。 2 结果与分析 2.1 RT-PCR扩增结果 对采集的84份南瓜病毒病样本（叶片）提取 总RNA，利用不同特异性引物进行RT-PCR检测， 部分检测结果见图1。待测样品中引物CMV-F/ CMV-R可扩增出大小735 nbsp;bp的条带（图1-a）， nbsp;44 nbsp; 新优品种 栽培管理 本期视点 产业市场 病虫防控 nbsp;44 nbsp; 研究论文 中 国 蔬 菜 nbsp; nbsp; CHINA VEGETABLES 引物ZYMV-1/ZYMV-2可扩增出大小582 nbsp;bp的条 带（图1-b），引物WMV-1/WMV-2可扩增出大小 697 bp的条带（图1-c），阴性对照均未扩增出目的 条带。表明在待检样品中能分别测出CMV、ZYMV 和WMV，但未检测到SqMV、PRSV、PVY。 2.3 南瓜植株上病毒的复合侵染情况 北京地区84份南瓜病毒病样品中，发现14份 病样为2种病毒复合侵染，复合侵染率为16.67 nbsp; （表3） 。其中，北京顺义区南瓜病毒病复合侵染 种类为CMV和ZYMV，侵染率为18.75；海淀区 南瓜病毒病复合侵染种类为ZYMV和WMV，侵染 率为32.00，未检出3种病毒复合侵染。 表3 北京地区南瓜病毒复合侵染类型及分布 采样地 样品 数量 CMVZYMV ZYMVWMV CMVWMV 检出 数 nbsp;检出 率/ 检出 数 nbsp;检出 率/ 检出 数 nbsp;检出 率/ 顺义区 32 6 18.75 0 0 0 0 昌平区 15 0 0 0 0 0 0 大兴区 12 0 0 0 0 0 0 海淀区 25 0 0 8 32.00 0 0 总计 84 6 7.14 8 9.52 0 0 2.4 北京地区南瓜病毒病田间症状 南瓜病毒病的发生可贯穿植株整个生长发育 期，为系统性侵染。北京地区南瓜病毒病主要包括 花叶、褪绿和皱缩等症状，经室内分子检测后得知 田间病毒种类为CMV、ZYMV和WMV nbsp;3种。CMV 田间症状（图2-a） 叶片叶绿素分布不均，易出 现黄色或淡黄色病斑。严重时叶片变小变脆，出现 浅黄色部分斑驳，呈现黄绿分布不均的镶嵌状花叶 症状。ZYMV田间症状（图2-b）叶面出现花叶及 斑驳症状，部分叶肉逐渐褪绿黄化，易出现明脉。 严重时植株矮化，节间变短，叶缘卷曲形成鸡爪状， 图1 南瓜部分样品 RT-PCR检测结果 a为CMV引物扩增结果，b 为ZYMV引物扩增结果，c 为WMV 引物扩增结果；M，BM5000 nbsp;DNA nbsp;Marker；N，健康植株；1～11， 部分感病植株。 M N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1011 2 000 bp 1 000 bp 750 nbsp;bp 500 bp 250 bp 100 bp a 2 000 bp 1 000 bp 750 nbsp;bp 500 bp 250 bp 100 bp b M N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 2 000 bp 1 000 bp 750 nbsp;bp 500 bp 250 bp 100 bp c M N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 2.2 南瓜主要病毒种类检测结果 对采集的84份南瓜病毒病样本进行PCR检 测，其中79份病样检测显示阳性，检出3种病 毒分别为CMV、ZYMV和WMV，病毒检出率 94.05。其中CMV检出率最高，可达52.38；其 次为ZYMV，检出率44.01；WMV检出率14.29 （表2） 。因此，CMV在北京地区南瓜上侵染最普 遍，为优势病毒种类。 北京不同地区南瓜病毒种类及发生程度有所 差异（表2） 。在南瓜植株上检出的病毒种类最多 的是顺义区和海淀区，检测到3种病毒，这2个地 区南瓜病毒病发生最为严重；其次是昌平区和大兴 区，分别检测出2种病毒，该地区病毒病危害较轻。 表2 北京地区南瓜病毒种类及分布 采样地 样品 数量 CMV ZYMV WMV 检出 数 nbsp;检出 率/ 检出 数 nbsp;检出 率/ 检出 数 nbsp;检出 率/ 顺义区 32 21 65.63 11 34.38 4 12.50 昌平区 15 10 66.67 2 13.33 0 0 大兴区 12 8 66.67 4 33.33 0 0 海淀区 25 5 20.00 20 80.00 8 32.00 总计 84 44 52.38 37 44.01 12 14.29 图2 南瓜病毒病田间发病症状 a，CMV侵染南瓜叶片症状；b，ZYMV侵染南瓜叶片症状；c，WMV侵染南瓜叶片症状；d，CMVZYMV复合侵染南瓜叶片症状；e， ZYMVWMV复合侵染南瓜叶片症状。彩色图版见中国蔬菜网站veg.org。 a b c d e nbsp;45 nbsp; 新优品种 栽培管理 本期视点 产业市场 病虫防控 nbsp;45 nbsp; 研究论文 中 国 蔬 菜 nbsp; nbsp; CHINA VEGETABLES 并常伴有蕨叶及叶面凹凸起伏症状。WMV田间症 状（图2-c） 叶片变小变硬，叶缘部分失绿并伴 有斑驳等症状。发病中后期植株表现皱缩矮化、叶 片卷曲，发病严重时茎蔓变短，发病组织呈瘤状突 起。混合侵染的植株发病症状表现较为复杂，发病 较重。CMV和ZYMV复合侵染后植株矮化，叶缘 卷曲，叶片颜色变浅，出现蕨叶及叶面不平现象（图 2-d）。ZYMV和WMV复合侵染现象广泛存在，其 症状在叶片上表现明显，叶片出现褪绿黄化，易形 成深浅绿色相间花叶，伴有皱褶卷曲现象。有时叶 缘处有斑驳突起，病株生长迟缓，开花结果后病情 趋于加重（图2-e）。 3 结论与讨论 病毒病是制约南瓜生产的重要因素之一，随着 我国南瓜种植面积逐年增加，病毒病的危害日益加 重，给南瓜生产造成严重的经济损失。南瓜病毒病 在我国长江地区、内蒙古、新疆、黑龙江等地普遍 发生（马英，2017） 。不同地区引起南瓜病毒病的 毒源种类不尽相同，新疆石河子地区南瓜病毒病毒 源种类主要为CMV、ZYMV、WMV、PRSV-W（任 琛荣 nbsp;等，2016） ；黑龙江地区南瓜病毒病的毒源 种类为CMV和WMV（杨国慧，2003）。本试验结 果表明，侵染北京地区南瓜的主要毒源有CMV、 ZYMV和WMV nbsp;3种，未检测到SqMV、PRSV、 PVY等其他病毒，由于病毒分布具有区域性，目 前SqMV只在黑龙江南瓜上有相关报道（李凤梅， 2002） 。其他病毒种类也未检出，可能是由于采样 数量少或部分南瓜植株病毒症状表现不明显，导致 漏采。在所有检测样品中CMV的检出率较高，可 能是由于CMV寄主范围广，可侵染1 000多种单、 双子叶植物（王海河 nbsp;等，2001），且CMV可由60 多种蚜虫进行非持久性传播，因此成为北京地区 南瓜病毒病优势毒源。此外，本次采集样本共84 份，其中有79份病样显示阳性，5份疑似感染南 瓜病毒病，但在该样本内未检测到病毒，可能是生 理性病害或药害所致。 瓜类病毒复合侵染现象在不同地区均有报道， 部分学者对我国瓜类主产区进行病毒种类调查， 发现存在多种病毒复合侵染现象，其中以PRSV和 WMV组合最为常见，占复合侵染组合的31.25 （尤毅 nbsp;等，2016） ；重庆地区南瓜检测样品中有 93.22的样品受2种以上病毒复合侵染（青玲 等， 2010） 。本试验中2种病毒复合侵染率为16.67， 可能与连作、传毒媒介、种子与土壤带毒有关。 尤其是昆虫传毒，CMV、ZYMV nbsp;、WMV均可通过 蚜虫进行传播，部分蚜虫可携带多种病毒进行再 侵染，导致一种植株上出现2种或2种以上病毒复 合侵染现象。也可能与病毒越冬习性有关，如国 内学者在重庆地区对南瓜病毒病进行鉴定，发现 农田周围葎草上存在7 nbsp;种病毒，且复合侵染的比 例高达80（青玲 等，2009）。CMV、ZYMV和 WMV均为种传病毒（杨国慧，2003） ，再加上田 间管理不当、单一品种种植模式等，成为南瓜病 毒病发生严重且存在复合侵染的主要原因。 本试验已检测出北京地区南瓜病毒病的毒源种 类主要有CMV、ZYMV和WMV，但受采集数量和 地域性的限制，无法涵盖北京地区南瓜病毒所有种 类， 因此， 是否存在其他病毒种类还有待进一步研究。 参考文献 冯光惠，杜虎平，李夏隆，亢福仁.2014.陕北地区马铃薯Y病 毒的RT-PCR检测及其序列分析.山西农业科学，42（9） 941-944. 李凤梅.2002.黑龙江省南瓜病毒病毒原鉴定和品种资源抗性筛选 的研究〔硕士论文〕.哈尔滨东北农业大学. 李昕升，吴昊，刘宜生.2017.南瓜属作物与南瓜品种资源.中国 野生植物资源，36（5）1-6. 廖富荣，叶志红，陈青，吴媛，陈红运，林石明.2013.应用RT- PCR和IC-RT-PCR方法检测南瓜花叶病毒.植物检疫，27 nbsp;（2）60-64. 刘嘉裕，戴良英，刘勇，张德咏，谭新球，李迅，唐前君.2017. nbsp;长沙地区南瓜的小西葫芦黄花叶病毒检测及其分子进化分 nbsp;析.湖南农业大学学报自然科学版，43（3）274-281. 马英.2017.籽用西葫芦病毒病发病流行原因分析及防治.中国蔬 菜，（7）86-88. 青玲，杨水英，孙现超，王进军，周常勇.2009.从葎草中检出复 合侵染的多种病毒.植物保护，35（4）138-139. 青玲，包凌云，周常勇，杨水英，孙现超.2010.重庆南瓜病毒病病 原 ELISA 检测及CMV变异分析.园艺学报，37（3）405-412. 任春梅，程兆榜，杨柳，缪倩，周益军.2015.江苏省葫芦科作物 6种病毒的多重 RT-PCR 方法及应用.江苏农业学报，31（4） 756-763. 任琛荣，郝小军，都业娟，向本春.2016.新疆石河子及新湖籽用 西葫芦病毒病分子检测.北方园艺，（1）102-106. 宋婷婷，陈荣溢，杨雷亮.2007.应用多重RT-PCR nbsp;检测烟草上的 nbsp;46 nbsp; 新优品种 栽培管理 本期视点 产业市场 病虫防控 nbsp;46 nbsp; 研究论文 中 国 蔬 菜 nbsp; nbsp; CHINA VEGETABLES TMV和CMV.辽宁农业科学，（1）53-54. 王海河，林奇英，谢联辉，吴祖建.2001.黄瓜花叶病毒三个毒株 对烟草细胞内防御酶系统及细胞膜通透性的影响.植物病理 学报，31（1）43-49. 王璐.2017.南瓜籽不同干燥方式及工艺对南瓜籽油功能性品质的 影响〔硕士论文〕.北京中国农业大学. 杨国慧.2003.滇黑两省南瓜病毒病病原鉴定及其外壳蛋白基因克 隆〔博士论文〕.哈尔滨东北农业大学. 尤毅，李华平，谢大森.2016.侵染冬瓜的病毒病原种类鉴定.植 物保护，42（2）182-186. 周贤.2013.苏丹首次报道南瓜感染番木瓜环斑病毒.植物检疫， （3）100. Fletcher nbsp;J nbsp;D，Wallace nbsp;A nbsp;R，Rogers nbsp;B nbsp;T.2000.Potyviruses nbsp;in nbsp;New nbsp;Zealand nbsp;buttercup nbsp;squash（Cucurbits maxima nbsp;Duch. ） yield nbsp;and nbsp;quality nbsp;effects nbsp;of nbsp;ZYMV nbsp;and nbsp;WMV nbsp;2 nbsp;virus nbsp;infections.New nbsp;Zealand nbsp;Journal of Crop and Horticultural Science，28（1）17-26. Lecoq H，Dafalla G，Desbiez C，Wipfscheibel C，Delecolle B.1997. nbsp;Biological nbsp;and nbsp;molecular nbsp;characterization nbsp;of nbsp;Moroccan nbsp;Watermelon nbsp;mosaic virus nbsp;and nbsp;a nbsp;potyvirus nbsp;isolate nbsp;from nbsp;Eastern nbsp;Sudan.Plant nbsp;Disease，85（5）547-552. Identification of Pathogen Species of Virus Diseases Infecting Squash in Beijing Area CHEN Li-da，CAO Jin-qiang，SHI Yan-xia，CHAI A-li，XIE Xue-wen *，LI Bao-ju * （Insititute nbsp;of nbsp;Vegetables nbsp;and nbsp;Flowers，Chinese nbsp;Academy nbsp;of nbsp;Agricultural nbsp;Sciences，Beijing nbsp;100081，China） Abstract In nbsp;order nbsp;to nbsp;clear nbsp;and nbsp;definite nbsp;species nbsp;of nbsp;squash nbsp;virus nbsp;diseases nbsp;in nbsp;Beijing nbsp;area nbsp;and nbsp;their nbsp;main nbsp;infection nbsp;pathogens，this nbsp;paper nbsp;collected nbsp;84 nbsp;squash nbsp;samples nbsp;with nbsp;suspected nbsp;virus-like nbsp;symptoms nbsp;during nbsp;2016- 2017 nbsp;from nbsp;Beijing nbsp;area，and nbsp;carried nbsp;out nbsp;detection nbsp;by nbsp;RT-PCR nbsp;used nbsp;6 nbsp;pairs nbsp;of nbsp;specific nbsp;virus nbsp;primers.The nbsp;results nbsp;showed nbsp;that nbsp;79 nbsp;samples nbsp;were nbsp;positive，among nbsp;which Cucumber mosaic virus nbsp;（CMV） nbsp;had nbsp;the nbsp;highest nbsp;detection nbsp; nbsp;rate nbsp;-52.38，followed nbsp;by Zucchini yellow mosaic virus nbsp;（ZYMV） nbsp;and nbsp;Watermelon mosaic virus （WMV）.Their nbsp;detection rate were 44.01 and 14.29，respectively.Other viruses were not yet detected.In addition，16.67 nbsp;samples nbsp;were nbsp;mix-infected nbsp;by nbsp;2 nbsp;kinds nbsp;of nbsp;viruses.Mix nbsp;infection nbsp;of nbsp;CMV nbsp;and nbsp;ZYMV nbsp;took nbsp;7.14.Mix nbsp;infection nbsp;of nbsp;ZYMV and WMV took 9.52.CMV was the prent pathogenic virus in Beijing area，where the mix infection of nbsp;viruses on squash was existed. Key wordsSquash；Virus diseases；Species identification 早佳（8424） 该品种为吴明珠院士选配的早熟西瓜一代杂种，为保 护地专用品种。果实发育期30～35天，单瓜质量3～6 kg， 中心含糖量12以上，每667 nbsp;m 2 （1亩）产量2 nbsp;000～3 nbsp;000 nbsp;kg；果实圆球形，果皮薄、绿色底覆青黑色条纹，果肉粉 红色，质地细松脆，品质佳。 S-甜王 植株生长强健，坐果率高，早熟，坐果后28天左右 成熟；果实高圆形，果皮绿色覆明显的深色条纹，单果质 量8～10 nbsp;kg左右，果肉鲜红，细腻、甜脆，中心含糖量 13；耐贮运，适合南北方保护地及露地栽培，深受市场 nbsp;欢迎。 玉娘 生长势强，耐枯萎病，坐果率高；果实高球至短椭圆 形，单瓜质量1.5 kg左右，果皮白色，表面光滑或偶有稀疏 网纹，果肉淡绿色，肉厚，中心可溶性固形物含量17左 右，肉质柔软细腻；播种至始收80～100天，坐果至采收 40～50天。 美都 中熟，开花至果实成熟约40天，一般单瓜质量约5 nbsp;kg以上；果实圆球至高球形，果皮绿色覆墨绿条纹，如 果实膨大期遇低温，果皮底色和条纹会加深，果肉桃红 色，中心含糖量约11～12，品质好；果皮稍硬，较耐 nbsp;贮运。 封面说明 温州市神鹿种业有限公司 地址浙江省温州市瓯海经济开发区西经二路 17号 nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;邮编 325014 电话0577-88623355 nbsp; 88623344 nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;传真 0577-88623838 nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; http// nbsp;47 nbsp; 新优品种 栽培管理 本期视点 产业市场 病虫防控 nbsp;47 nbsp; 研究论文 中 国 蔬 菜 nbsp; nbsp; CHINA VEGETABLES/p