链格孢菌毒素对中国月季主要营养物质含量的影响_李云仙.pdf

第 38 卷 第 3 期 西 南 林 业 大 学 学 报 Vol．38 No．32018 年 5 月 JOUＲNAL OF SOUTHWEST FOＲESTＲY UNIVEＲSITY May 2018doi 10． 11929/j． issn． 2095－1914． 2018． 03． 015链格孢菌毒素对中国月季主要营养物质含量的影响李云仙1， 2李永梅3杨发忠2李 靖4 1． 云南农业大学植物保护学院 ， 云南 昆明 650201; 2． 西南林业大学化学工程学院 ， 云南 昆明 650224;3． 云南农业大学资源与环境学院 ， 云南 昆明 650201; 4． 西南林业大学生命科学学院 ， 云南 昆明 650224摘要 用链格孢菌毒素细交链孢菌酮酸 TeA 处理中国月季叶片后 ， 用凯氏定氮法 、烘干法 、蒽酮比色法和电感偶合等离子发射光谱仪 ICP-OES 分别测定处理 2、6、10、14、20 d 后 ， 处理部位叶片和位于处理叶片上方和下方的叶片中蛋白质 、水分 、可溶性糖和矿质元素的含量 。结果表明 与健康叶片相比 ， 用 TeA 处理后的叶片其蛋白质 、水分和可溶性糖含量均明显下降 ，蛋白质含量变化较复杂 ， 在处理 6 d 后 ， 其含量显著增加 ， 之后又随处理时间的增加而降低 。蛋白质含量从 208. 41 mg/g 降低至 45. 09 mg/g; 水分含量从 77. 36 下降到 69. 56， 下降了7. 79; 可溶性糖含量从 12. 58 mg/g 降低到 8. 45 mg/g。中国月季用链格孢菌毒素 TeA 处理后多种矿质元素含量发生变化 ， Ca、Mg、K、S、P、Zn 等元素含量降低 ， Al、Cu、Mn、Na 等元素含量升高 。并且 TeA 处理具有空间效应 ， 对位于处理部位上方和下方的叶片的营养元素都有影响 。关键词 中国月季 ; 链格孢菌毒素 ; 水分 ; 蛋白质 ; 矿质元素 ; 可溶性糖中图分类号 S685．12 文献标志码 A 文章编号 2095－1914 2018 03－0101－07Effects of Alternaria Toxin on the Contentsof Nutrients in Ｒosa chinensisLi Yunxian1， 2， Li Yongmei3， Yang Fazhong2， Li Jing4 1． College of Plant Protection， Yunnan Agricultural University， Kunming Yunnan 650201， China;2． College of Chemical Engineering， Southwest Forestry University， Kunming Yunnan 650224， China;3． College of Ｒesources and Environment， Yunnan Agricultural University， Kunming Yunnan 650201， China;4． College of Life Science， Southwest Forestry University， Kunming Yunnan 650224， ChinaAbstract Ｒosa chinensis was treated with tenuazonic acid TeA toxin of Alternaria tenuissima． To determinethe content of protein， water， soluble sugar and elements in treated and above and below treatment site leaves ofＲ. chinensis after 2， 6， 10， 14， 20 days． The s are Kjeldahl ， drying ， anthrone colorimetric and inductively coupled plasma emission spectrometer ICP-OES ． The findings indicated that comparedwith healthy leaves， the contents of protein， water and soluble sugar in leaves treated with TeA decreased signifi-cantly． The change of protein content is complex， after 6 days treatment， the content of protein increased signifi-cantly， then it decreases with the increase of treated time． Protein content decreased from 208. 41 mg/g to 145. 09mg/g; Moisture content decreased from 77. 36 to 69. 56， dropped by 7. 79; Soluble sugar content decreasedfrom 12. 58 mg/g to 8. 45 mg/g． After treated by the A. tenuissima toxin TeA， the content of mineral elements inrose leaves have changed， Ca， Mg， K， S， P， Zn et al decreased， but Al， Cu， Mn， Na et al increased． The toxin收稿日期 2018－01－10; 修回日期 2018－03－04基金项目 国家自然科学基金项目利 31560517、31160354 资助 ; 云南省中青年学术与技术带头人培养项目 2015HB049 资助 。第 1 作者 李云仙 1980 ， 女 ， 博士研究生 ， 实验师 。研究方向 化学生态学 。Email liyunxian 163．com。通信作者 李永梅 1966 ， 女 ， 教授 。研究方向 植物营养 。Email youngmaylee 126．com。TeA treatment has a spatial effect， which affects the nutrient above and below the treated leaves．Key words Ｒosa chinensis; Alternaria tenuissima toxin; water; protein; mineral element; soluble sugar植物体进化了一系列防御机制来防止昆虫的取食 ， 这些机制主要分为两类 组成型防御反应和诱导型防御反应 ， 组成型防御反应是植物固有的防御反应 ， 具有特异性 ， 以储存化合物 、结合化合物或活化化合物前体的形式存在 ， 这些物质都很容易受伤害诱导激发 ， 迄今为止 ， 大多数的防御反应都是组成型的防御反应 。诱导型防御反应仅发生在植物被伤害之后 ， 例如 ， 当植物遭遇食草动物侵袭时 ， 体内茉莉酸水平迅速升高 ， 促使植物中许多参与反应的蛋白质合成［ 1－3］。植物受病原物侵染后 ， 其体内的蛋白质含量会发生变化［ 4］， 植物病原菌的入侵能引起寄主植物产生一系列的生理生化和代谢变化 ， 如一些专性寄生真菌侵染后常会使寄主植物叶绿体的非环式电子传递受到抑制［ 5］。中国月季感染白粉菌后 ， 体内蛋白质 、糖的含量以及矿质元素的种类和含量均发生了变化［ 6－7］。在侵染后期 ， 许多病原物可引起寄主植物的质膜透性改变 ， 叶表的保护组织受到破坏 ， 导致水分大量流失 ， 造成寄主植物局部坏死 ，尤其是寄主在感染锈病后 ， 表皮被成熟的锈孢子突破甚至撕裂 ， 表皮层和角质层受到了损害 ， 失去了保护叶片的作用 ， 蒸腾作用会大大加强［ 8］，使植物的生长发育受到影响 。有研究发现 ， 病原菌侵染对昆虫存在有利或者不利影响 ， 例如象虫 Apion onopordi 在锈菌 Puccinia punctiis 感染的田蓟 Cirsium arvense上 ， 比在健康田蓟上有更高的存活率［ 9］; 甜菜夜蛾 Spodoptera exigua 对感染白粉病 Sphaerothecapannosa 的中国月季 Ｒosa chinensis 取食和产卵量均明显下降［ 10］。目前 ， 对于病虫之间通过寄主植物的介导作用而进行的间接相互作用的研究很少见报道 ， 特别是对这种通过病原真菌毒素诱导寄主植物产生对植食性昆虫抗性的机理的研究还未见报道 。链格孢菌 Alternaria tenuissima 属真菌门 、半知菌亚门 、丝孢纲 、丝孢目 ， 是一类自然界中普遍存在的植物致病菌 ， 其致病的主要机理是通过产生多种毒素 ， 造成被侵染植物组织的病理反应和伤害 ， 链格孢菌毒素能破坏质膜 、叶绿体 、以及线粒体的结构 ， 从而影响细胞正常代谢［ 11］。链格孢菌 Alternaria sp． 粗毒素处理中国月季对月季长管蚜有十分明显的抑制作用［ 12－13］。毒素处理后的中国月季对月季长管蚜表现出明显的趋避作用的机理目前仍然不清楚 。在病虫互作关系的研究中 ， 寄主植物介导的间接病虫互作关系的影响机理仍不清楚 ， 需要对寄主植物生理生化方面进行进一步研究 ， 本实验对进一步探讨寄主 、病害 、虫害三者互作机理具有重要的参考意义 。1 材料与方法1. 1 实验材料样品采自云南省昆明市呈贡 、昆阳等月季种植基地 ， 选取无病虫害生长基本一致的植株于大棚中培养 50 d 后备用 ; 链格孢菌是从斗南中国月季种植基地的月季上按照常规方法分离纯化得到 。仪器及试剂主要有 自动凯氏定氮仪 瑞典 FOS-STECATOＲ 公司 ， 2300 型 ; 样品消化器 瑞典FOSSTECATOＲ 公司 ， 2300 型 ; 盐酸标准溶液准储备液 ; 40氢氧化钠溶液 ; 浓硫酸 分析纯 ;高纯氩气 99. 999 ; 微波消解仪 美国 CEM，Mars5 ; VISFA-MPX 型电感耦合等离子体发射光谱仪 美国 VAＲIAN 公司 ; 可见分光光度计 ; 各种矿质元素标准储备溶液 国家钢铁材料测试中心 ， 浓度为 1 000 μg/mL; 硝酸 、双氧水为优级纯 ; 超纯水 ; 玻璃仪器均经 10HNO3浸泡过夜 ，用超纯水清洗 。1. 2 实验方法1. 2. 1 链格孢菌粗毒素的提取及细交链孢菌酮酸的分离制备将分离纯化的链格孢菌株种在 PDA 培养基上 ，倒置培养至菌落铺满平板 。3 平板为一组 ， 将菌株连同培养基用刀片划成 1 cm 1 cm大小的小块放置于锥形瓶内 ， 向锥形瓶内倒入有机提取液 V 乙酸乙酯 ∶ V 甲醇 ∶ V 冰醋酸 80 ∶ 15 ∶ 5 ，使提取液刚好没过菌株和培养基 。重复提取 3 次 ，合并提取液 。在旋转蒸发仪上蒸干 ， 用 4 mL 甲醇将固体萃取物溶解 ， 装在 5 mL 冻存管中 ， 4 ℃保存 。提取到的粗毒素经 0. 45 μm 滤膜过滤后 ， 进样到 HPLC 中进行分析制备 ， 流动相为 100乙腈 ， 流速为 0. 6 mL/min; 进样量 20μL; 检测波长 280 nm。当目标峰出现时 ， 收集流出物 ， 通过多次收集目201 西 南 林 业 大 学 学 报 第 38 卷标组分的洗脱液 ， 并在旋转蒸发仪上蒸干后 ， 就获得了高浓缩的洗脱液 ， 合并浓缩后的洗脱液 ，－20 ℃保存备用 。将获得的 TeA 用高效液相色谱再次分析 ， 与标准品对比验证所得目标产物是否一致 。1. 2. 2 毒素细交链孢菌酮酸处理月季用一定浓度的细交链孢菌酮酸 TeA 溶液均匀喷洒经温室大棚培养的无病虫害月季 每天喷洒1 次 ， 选择月季植株中间的 1 株复叶喷洒 ， 位于这株复叶以上和以下的复叶不做处理 ， 测定 2， 6，10， 14， 20 d 后叶片中蛋白质 、糖 、水分和矿质元素的含量 。以相应健康植株叶片作为对照 。1. 3 测定方法1. 3. 1 叶片蛋白质含量的测定健康和 TeA 处理后的中国月季叶片洗净烘干粉碎后装袋备用 。称取 0. 1 g 样品于洗净干燥的消化管内 ， 每个试样做 3 个平行对照 ， 称取配制好的m K2SO4 ∶ m CuSO4 比例为 5 ∶ 1 的催化剂 ，吸取浓硫酸 10 mL 于消化管中 ， 将加好试剂的消化管放到消化炉上预热 30 min 200 ℃ ， 消化温度为420 ℃， 消化至反应液呈透明蓝绿色 ， 消化时间为1. 5 h 左右 ， 取出冷却 15～20 min， 将消化管放入2300 型全自动凯氏定氮仪 ， 关上安全门 ， 仪器自动进行蒸馏 、滴定 、计算最后记录结果 。1. 3. 2 叶片可溶性糖含量的测定可溶性糖含量的测定用葸酮比色法 ， 测定步骤如下 。1 葡萄糖标准曲线的绘制 葡萄糖在 80 ℃烘箱中烘至恒质量 ， 精确称取 2. 0000 g， 加蒸馏水溶解 ， 并定容至 1 L， 4 ℃ 保存 。使用时稀释 10 倍 。得到含糖量为 0. 2 mg/mL 的标准液 ， 用蒸馏水将标准葡萄糖溶液稀释成一系列 0～100 μg/mL 的不同浓度的标准溶液 ， 放入 7 支具塞试管中 ， 分别吸取 1 mL 标准溶液于试管中 ， 各加入 5 mL 蒽酮试剂 ， 混匀 ， 沸水浴 10 min， 冷却 ， 用分光光度计测定 625 nm 处的吸光度 ， 绘制标准曲线 。2 样品中可溶性糖的提取 称取样品 0. 5 g 左右 ， 剪碎研磨至匀浆 ， 倒入三角瓶中 。加入 10 mL80 乙 醇 ; 80 ℃ 水 浴 20 min， 不断搅拌 ， 冷却 ;4 000 r/min 离心 5 min， 残渣中加 5 mL 80乙醇 。重复在 80 ℃水浴中提取 2 次 ， 合并上清液 ; 加入10 mg 活性炭 ， 80 ℃水浴 15 min， 过滤 ， 定容至 25mL， 取 0. 2 mL 样品提取液 ; 加入 0. 8 mL 蒸馏水 ，混合 ; 再加入 5 mL 蒽酮试剂 ， 小心混合 ， 沸水浴10 min， 冷却 。用分光光度计测定 625 nm 处的吸光度的值 ， 从标准曲线上的方程得到提取液中糖含量 。1. 3. 3 叶片水分的测定水分含量测定参考［ 14］的方法稍作改动 ， 采用烘箱烘干的方法进行测定 。把采集到的健康和毒素 TeA 处理后的中国月季叶片洗干净然后晾干 ，精密称取一定量的新鲜叶片 ， 60 ℃烘干至恒质量 ，根据失去水分的质量计算出叶片的含水率 。健康和毒素 TeA 处理后的叶片各平行测定 5 次 ， 取平均值 。1. 3. 4 叶片矿质元素的测定1 样品消解 。采集毒素处理后的月季叶片和健康月季叶片 ， 于烘箱中 80 ℃烘干 ， 烘干后的样品取出用研钵研碎 ， 然后分别精确称取 0. 2～0. 3 g样品倒入消解罐中 ， 精确到 0. 1 mg， 依次加入 5mL 浓硝酸 ， 2 mL 双氧水 ， 然后把消解罐置于微波消解仪中 。按表 1 程序进行消解 ， 消解完成后待温度冷却至室温 ， 将消解罐中的液体转移到 50 mL 容量瓶中 ， 用 5硝酸定容 。平行测定 3 次并做空白试验［ 15］。2 分析谱线的选择 。为了避免待测矿质元素之间相互影响和干扰谱线 ， 每个元素均选取 2 ～3条特征谱线进行测定 ， 综合强度分析 、干扰情况 、稳定性等因素 ， 选择干扰比较小 、精密度比较高的适合待测样品的分析线作为仪器的工作分析谱线 。3 工作曲线的建立 。分别吸取标准空白溶液和不同浓度的各种矿质元素标准工作溶液 ， 注入电感耦合等离子体光谱仪 ICP-OES 中 ， 在选定的仪器参数下 ， 用标准系列浓度的溶液进样 5 次 ，以平均吸收强度对各元素浓度做标准工作曲线的回归方程 ， 并获得相应的相关系数 Ｒ2应不小于 0. 999。4 加标回收实验 。各待测元素的标准溶液按一定的量分别加入到实验样品中 ， 按消解样品的方法进行消解 ， 按照样品测定方法重复测定 5 次 。加标回收率 加标试样测定值－试样测定值 /加标量 100;相对标准偏差 ＲSD标准偏差 SD /计算结果的算术平均值 X 100。2 结果与分析2. 1 毒素处理后月季叶片中蛋白质含量变化毒素处理月季叶片蛋白质含量的时间和空间变化见图 1。301第 3 期 李云仙等 链格孢菌毒素对中国月季主要营养物质含量的影响图 1 毒素处理月季叶片蛋白质含量的时间和空间变化Fig. 1 Temporal and spatial changes of protein contentin leaves of Ｒ. chinensis with toxin从图 1 可看出 ， 与健康叶片相比 ， 处理 2 d 后叶片内蛋白质含量已经下降 ， 但是感病 6 d 后 ， 叶片中蛋白质含量突然增高 ， 后随处理时间延长而进一步降低 ， 从 208. 41 mg/g 降低至 145. 09 mg/g，差异达显著水平 P ＜ 0. 05 。毒素处理月季对其叶片中蛋白质含量存在一定的空间效应 ， 而且对上方空间影响大于下方 ， 处理 20 d 时 ， 上方月季叶片中蛋白质含量下降比下方月季叶片中蛋白质含量大 。总体来看 ， 蛋白质的含量随着处理时间的延长而逐渐降低 ， 3 个部位的蛋白质含量都与处理时间呈负相关关系 。2. 2 毒素处理后月季叶片中可溶性糖含量变化毒素处理前后月季叶片中可溶性糖含量的时间和空间变化变化见图 2。图 2 毒素处理前后月季叶片中可溶性糖含量的时间和空间变化变化Fig. 2 Temporal and spatial changes of soluble sugar contentin leaves of Ｒ. chinensis treated with toxin由图 2 可以看出 ， 随 TeA 处理时间的增加 ，叶片内可溶性糖含量呈下降趋势 ， 呈明显负相关关系 。且处理部位可溶性糖下降量显著高于处理部位以上和以下的叶片 ， 3 个部位可溶性糖含量均下降 ， 说明 TeA 处理对月季叶片可溶性糖含量的影响存在时空效应 。2. 3 毒素处理后月季叶片中水分含量变化毒素处理月季叶片水分含量的时间和空间变化见图 3。图 3 毒素处理月季叶片水分含量的时间和空间变化Fig. 3 Temporal and spatial changes of water contentin leaves of Ｒ. chinensis with toxin从图 3 可知 ， 链格孢菌毒素对月季叶片水分含量的影响很大 ， 毒素处理 2 d 后 ， 月季叶片含水量开始明显下降 ， 并随处理时间的增加而显著降低 ，到 20 d 时 ， 与健康叶片相比 ， 水分含量下降 8. 04左右 。同时 ， 毒素处理月季对其叶片中水分含量存在明显的空间效应 ， 位于处理叶片上方和下方的叶片含水量也随之下降 ， 处理时间在 10 d 以前 ，与处理时间呈负相关关系 。10 d 以后 ， 水分含量几乎不再变化 。2. 4 毒素处理前后月季中矿质元素含量的变化用电感耦合等离子体光谱仪 ICP-OES 测定了链格孢菌毒素 TeA 处理中国月季植株后 ， 月季叶片中矿质元素的含量 ， 测定结果见表 1～2。由表 1～2 可知 ， 健康中国月季叶片和用链格孢菌毒素处理后的月季叶片中均检测出 17 种元素 ，Ca、Mg、K、S、P 在 2 种叶片中含量都很高 ， 与健康叶片对比 ， Ca、Mg、K、S、P、Sn、Zn 在毒素处理后的叶片中含量均明显下降 P ＜ 0. 05 ，且下降量随处理时间的增加而增大 。Al、B、Cu、401 西 南 林 业 大 学 学 报 第 38 卷Mn、Na、Si、Sr 7 种元素在毒素处理后的叶片内含量高于健康叶片 ， 在处理 6 d 后 ， B、Cu、Mn、Na、Si、Sr 6 种元素含量显著高于健康叶片 P ＜0. 05 ; 由此可以看出 ， 中国月季用链格孢菌毒素 TeA 处理后多种矿质元素含量发生变化 ， 10 种元素含量降低 ， 有 7 种元素含量升高 ， 含量降低的矿质元素主要是一些对植物生命代谢起着重要作用的元素 ， 例如 Ca、Mg、K、S、P， 下降幅度比较大 。Al、B、Cu、Mn、Na、Si、Sr 在毒素处理后的叶片中含量升高 ， 其中 Na 含量增大较多 ， TeA 处理后的第 2 天 ， Na 含量由 53. 37 μg/g 上升 1 015. 42μg/g， 增加了将近 20 倍 ， 之后有所下降 ， 但仍然比对照高 10 倍以上 ; Ba、Be、Ca、Mg、K、Mn、Fe 等元素变化较复杂 ， 呈现先降低后又升高之后又降低的趋势 ; Al 和 Si 含量在第 20 天最高 ， 分别为 46. 19 μg/g 和 203. 21 μg/g， Mn 元素在处理 2天后 ， 含量降低 ， 之后又直线升高 ; 位于处理部位上方和下方的叶片中矿质元素的变化和链格孢菌毒素 TeA 处理部位叶片中矿质元素含量的变化一致 ， 说明 TeA 处理对月季叶片矿质元素含量的变化存在一定的空间效应 。与处理部位叶片中矿质元素含量不同之处有 Al 元素含量在第 10 天达到最高 ， 之后又下降 ; Na 元素含量增高的量远远小于处理部位 ， Mn 元素含量增大量比处理部位高 。矿质元素的这种变化趋势可能与植物抗虫性有关 ， 需要进一步研究 。表 1 链格孢菌毒素 TeA 处理中国月季后叶片大量元素时间和空间的含量变化 μg/gTable 1 Temporal and spatial changes of major elements contents in leaves of Ｒ. chinensis leaves treated with TeA元素处理部位处理时间 /d0 2 6 10 14 20Ca 上 95 602. 941. 98 53 585. 3900. 52 85 440. 4201. 25 85 190. 1101. 41 78 433. 3401. 20 77 748. 2002. 58中 50 675. 5601. 29 67 190. 5201. 22 77 655. 8401. 07 74 307. 7901. 13 73 941. 8001. 92下 61 491. 6701. 33 74 355. 6701. 82 76 365. 8101. 42 81 315. 3301. 93 77 304. 0101. 21K 上 27 014. 912. 23 21 258. 0301. 12 20 341. 3301. 52 20 341. 3302. 89 24 067. 2801. 74 24 028. 0703. 32中 17 418. 0502. 88 19 481. 3801. 66 19 027. 8001. 12 25 144. 5403. 52 23 273. 1701. 59下 18 693. 9603. 45 17 937. 2001. 20 19 454. 8701. 05 23 144. 3401. 73 22 959. 1401. 425Mg 上 46 353. 703. 87 40 439. 4101. 45 44 789. 7901. 34 44 789. 7902. 80 44 010. 6001. 23 36 988. 9801. 51中 38 535. 6101. 45 38 293. 3101. 24 41 881. 2601. 66 37 418. 6500. 65 32 925. 7201. 08下 35 502. 2701. 56 40 312. 4501. 05 39 389. 7701. 26 37 164. 1601. 094 38 462. 4701. 44S 上 3 149. 500. 68 1 722. 1851. 13 2 521. 4421. 25 2 521. 4421. 69 2 459. 5521. 82 1 810. 2221. 01中 2 073. 3121. 48 2 474. 8561. 26 2 173. 9303. 27 2 146. 1641. 95 1 549. 3300. 94下 1 920. 8161. 34 2 444. 1971. 93 2 096. 6651. 50 2 201. 6451. 59 1 599. 7291. 47P 上 3 124. 671. 56 3 419. 2531. 55 3 547. 6612. 06 3 547. 6611. 26 2 997. 8642. 97 2 556. 2381. 37中 3 493. 3923. 41 3 437. 1591. 97 2 872. 9282. 34 2 904. 5861. 86 2 321. 4641. 32下 2 988. 0351. 29 3 082. 5751. 74 2 518. 0861. 08 2 984. 7311. 18 2 405. 1341. 09注 处理部位为 “中 ”， 上 、下表示位于处理部位以上和以下的叶片 ， 0、2、6、10、14、20 表示处理时间 ， 0 为健康叶片 对照 。表 2 链格孢菌毒素 TeA 处理中国月季后叶片微量元素时间和空间的含量变化 μg/gTable 2 Temporal and spatial changes of microelements contents in leaves of Ｒ. chinensis treated with TeA元素处理部位处理时间 /d0 2 6 10 14 20Al 上 28. 38 0. 15 28. 76 0. 63 33. 57 0. 32 45. 57 0. 61 32. 75 0. 32 29. 87 0. 67中 26. 10 0. 72 49. 66 0. 96 45. 26 0. 88 41. 03 0. 68 46. 19 0. 33下 29. 06 0. 21 32. 46 0. 07 45. 25 0. 85 30. 67 0. 35 37. 64 0. 24B 上 15. 76 0. 55 16. 09 0. 72 21. 62 0. 81 21. 62 0. 24 28. 06 0. 42 26. 81 0. 15中 20. 42 0. 58 19. 77 0. 81 31. 49 0. 88 27. 42 0. 91 24. 23 0. 61下 21. 31 0. 08 21. 49 0. 50 29. 05 0. 69 26. 92 0. 97 28. 79 0. 38501第 3 期 李云仙等 链格孢菌毒素对中国月季主要营养物质含量的影响续表 2元素处理部位处理时间 /d0 2 6 10 14 20Ba 上 2. 83 0. 23 1. 32 0. 52 2. 24 0. 42 2. 24 0. 81 2. 27 0. 76 2. 27 0. 62中 1. 40 0. 24 1. 86 0. 76 2. 06 0. 15 2. 59 0. 32 2. 40 0. 18下 1. 56 0. 15 2. 52 0. 54 2. 60 0. 11 2. 20 0. 38 2. 16 0. 15Be 上 0. 55 0. 03 0. 24 0. 09 0. 20 0. 08 0. 20 0. 07 0. 41 0. 06 0. 11 0. 02中 0. 37 0. 01 0. 33 0. 02 0. 21 0. 04 0. 48 0. 04 0. 10 0. 02下 0. 18 0. 04 0. 33 0. 04 0. 16 0. 06 0. 46 0. 02 0. 10 0. 01Cu 上 4. 73 0. 12 6. 86 0. 68 9. 94 0. 55 9. 94 0. 70 8. 78 0. 71 7. 62 0. 47中 7. 22 0. 76 9. 28 0. 76 7. 98 0. 25 9. 39 0. 32 7. 60 0. 17下 5. 85 0. 09 8. 20 0. 73 6. 98 0. 59 8. 64 0. 56 7. 35 0. 04Fe 上 282. 25 0. 44 200. 06 0. 91 232. 22 0. 77 232. 22 0. 31 184. 28 0. 75 213. 58 0. 24中 239. 64 0. 47 274. 29 0. 22 230. 99 0. 91 227. 66 0. 10 200. 33 0. 54下 171. 60 0. 65 565. 89 0. 14 253. 97 0. 56 698. 25 0. 88 199. 21 0. 20Mn 上 225. 40 0. 88 255. 24 0. 56 417. 64 0. 69 417. 64 0. 91 569. 95 0. 87 550. 90 0. 63中 222. 76 0. 74 495. 04 1. 81 411. 98 0. 88 430. 45 0. 97 528. 44 0. 13下 296. 55 0. 11 550. 84 0. 74 429. 13 0. 49 518. 41 0. 79 529. 37 0. 98Na 上 53. 37 0. 75 81. 24 0. 42 112. 86 1. 97 112. 86 0. 11 90. 65 0. 81 60. 69 0. 14中 1015. 43 1. 49 780. 35 0. 49 726. 72 0. 54 895. 78 0. 81 807. 60 0. 23下 117. 75 1. 09 250. 22 0. 61 106. 06 0. 21 69. 70 0. 55 286. 77 0. 79Si 上 80. 63 0. 50 81. 21 0. 06 92. 31 0. 77 92. 31 0. 71 168. 97 0. 48 191. 50 0. 14中 91. 04 0. 73 111. 86 0. 99 149. 70 0. 95 166. 18 0. 14 203. 22 0. 49下 100. 39 0. 32 120. 06 0. 74 164. 14 0. 63 176. 55 0. 17 202. 56 0. 59Sn 上 73. 83 0. 59 69. 49 0. 34 60. 35 0. 70 60. 35 0. 55 62. 51 0. 87 63. 84 0. 16中 71. 16 0. 56 66. 17 0. 33 66. 76 0. 13 64. 00 0. 04 70. 86 0. 07下 66. 88 0. 57 66. 45 0. 42 67. 69 0. 13 66. 12 0. 52 68. 15 0. 06Sr 上 12. 64 0. 56 13. 73 0. 76 21. 34 0. 50 21. 34 0. 41 32. 04 0. 17 26. 27 0. 70中 12. 67 0. 89 17. 12 0. 73 24. 95 0. 27 26. 15 0. 51 25. 21 0. 67下 18. 26 0. 99 19. 24 0. 06 21. 68 0. 13 27. 70 0. 16 27. 12 0. 76Zn 上 54. 87 0. 80 35. 86 0. 44 40. 68 0. 65 40. 68 0. 53 33. 69 0. 27 25. 50 0. 71中 35. 93 0. 83 34. 62 0. 52 29. 11 0. 39 26. 89 0. 12 27. 49 0. 74下 27. 84 0. 82 32. 00 0. 91 27. 33 0. 45 30. 66 0. 34 24. 01 0. 24注 处理部位为 “中 ”， 上 、下表示位于处理部位以上和以下的叶片 ， 0、2、6、10、14、20 表示处理时间 ， 0 为健康叶片 对照 。3 结论与讨论中国月季用链格孢菌毒素 TeA 处理后 ， 叶片内蛋白质 、可溶性糖 、水分含量与健康叶片相比均明显下降 ， 并且链格孢菌毒素 TeA 侵染中国月季叶片后 ， 三者都存在时间和空间效应 ， 随处理天数的增加 ， 水分和可溶性糖含量下降程度增大 ，蛋白质含量变化则呈现出较复杂的一个变化趋势 ，在处理 6 d 后月季叶片蛋白质含量高于健康叶片 ，之后又明显下降 ， 这个现象可能是因为 ， 月季受病原菌侵染后 ， 体内茉莉酸水平迅速升高 ， 促使植物中许多参与反应的蛋白质合成 ， 是植物主动防御的一个表现 ， 之后 ， 蛋白质含量显著下降 ， 可能是毒素进入叶片影响质膜通透性 ， 造成叶片细胞程序性死亡 ， 进而也导致叶片水分丧失 ， 水分含量降低 。Ca、Mg、K 等矿质元素对昆虫正常的生长发育起着关键的作用 ， 与健康叶片相比 ， TeA处理后的月季叶片中 ， Ca、Mg、K、S、P、Zn 这几种元素含量显著降低 ， 表明链格孢菌毒素对月601 西 南 林 业 大 学 学 报 第 38 卷季生长发育 、生理代谢有较大影响 ， 这可能是毒素处理月季叶片后影响月季长管蚜搜寻寄主及生长发育的重要原因之一 。月季叶片中 Al、B、Cu、Mn、Na、Si、Sr 7 种元素在毒素处理后含量大幅增高 ， 这可能与植物抗病性有关 ， 有研究表明 病原菌侵染中国月季后 ， 月季体内 Al、B、Cu、Mn 元素含量增高 ; 月季外施矿质元素后提高了月季对长管蚜的抗性 ， 矿质元素通过植物介导影响蚜虫与