苯并烯氟菌唑对尖孢炭疽菌的毒力及对其所致辣椒炭疽病的防效.pdf

植物保护学报JournalofPlantProtection 2023 50 3 830 838 DOI 10 13802 ki zwbhxb 2023 2021220 基金项目 国家重点研发计划 2022YFD1700504 山东省蔬菜产业技术体系 SDAIT 05 通信作者 Authorforcorrespondence E mail fliu 收稿日期 2021 12 15 苯并烯氟菌唑对尖孢炭疽菌的毒力 及对其所致辣椒炭疽病的防效 王爱萍 1 席淑文 1 张国福 2 丁绍武 3 禾丽菲 1 慕 卫 1 刘 峰 1 1 山东农业大学植物保护学院 山东省高校农药毒理与应用技术重点实验室 泰安271018 2 山东省农药检定所 济南250000 3 济南天邦化工有限公司 济南250000 摘 要 为 评 价 苯 并 烯 氟 菌 唑 对 辣 椒 炭 疽 病 的 防 治 潜 力 采 用 菌 丝 生 长 速 率 法 和 孢 子 萌 发 法 分 别 测 定 苯 并 烯 氟 菌 唑 对108 株 辣 椒 炭 疽 病 病 原 菌 尖 孢 炭 疽 菌Colletotrichum acutatum 菌 株 菌 丝 生 长 和 孢 子 萌 发 的 抑 制 活 性 通 过 辣 椒 活 体 接 种 试 验 比 较 苯 并 烯 氟 菌 唑 对 辣 椒 炭 疽 病 的 相 对 保 护 防 效 和 相对治疗防效 测定其对辣椒炭疽病的室内相对防效和田间相对防效 结果表明 苯并烯氟菌唑对 尖 孢 炭 疽 菌 孢 子 萌 发 的 抑 制 活 性 高 于 对 其 菌 丝 生 长 的 抑 制 活 性 对 孢 子 萌 发 及 对 菌 丝 生 长 的 有 效 抑 制 中 浓 度EC 50 分 别 为0 005 0 196 g mL 和0 073 3 398 g mL 苯 并 烯 氟 菌 唑 对 辣 椒 炭 疽 病 的 相 对 保 护 防 效 优 于 相 对 治 疗 防 效 240g a i hm 2 苯 并 烯 氟 菌 唑 对 辣 椒 炭 疽 病 的 相 对 保 护 防 效 可 达 85 64 240g a i hm 2 苯 并 烯 氟 菌 唑 喷 雾 处 理 对 辣 椒 炭 疽 病 的 田 间 相 对 防 效 均 在75 31 以 上 显著高于相同剂量的氟吡菌酰胺 氟啶胺和多菌灵的相对防效 总之 苯并烯氟菌唑对尖孢炭疽菌 有较高毒力 对辣椒炭疽病有稳定的田间防效 有开发为防治辣椒炭疽病新药剂的潜力 关键词 尖孢炭疽菌 苯并烯氟菌唑 毒力 炭疽病 防效 InhibitoryactivityofbenzovindiflupyragainstfruitrotpathogenColletotrichum acutatumanditscontrolefficacytopepperanthracnose Wang Aiping 1 Xi Shuwen 1 Zhang Guofu 2 Ding Shaowu 3 He Lifei 1 Mu Wei 1 Liu Feng 1 1 ShandongKeyLaboratoryofPesticideToxicology2 ShandongProvinceInstitutefortheControlof Agrochemicals Jinan250000 ShandongProvince China 3 JinanTianbangChemicalCo Ltd Jinan250000 ShandongProvince China Abstract Inordertouatetheapplicationpotentialofbenzovindiflupyrinthecontroloftheanthrac nose in pepper caused by fungal pathogen Colletotrichum acutatum the sensitivity to benzovindiflupyr of 108 C acutatum isolates from different regions of Shandong Province was determined with mycelial growthandsporegerminationtest therelativeprotectiveactivityandrelativecurativeactivityofbenzo vindiflupyr against pepper anthracnose were uated through pepper fruit inoculation test and the relative control effects in laboratory and field test of benzovindiflupyr on pepper anthracnose were veri fied The results showed that benzovindiflupyr had higher inhibitory activity against the conidial germi nation of C acutatum than that against the mycelial growth with EC 50 value ranged from 0 005 g mL to 0 196 g mLand from 0 073 g mLto 3 398 g mL respectively Benzovindiflupyr at the dosage of 240 g a i hm 2 provided relative protective effect of 85 64 which was higher than the relative cura tiveactivity Therelativecontrolefficacyofbenzovindiflupyrat240g a i hm 2 againstpepperanthrac nose was above 75 31 in the field test which was significantly higher than that of fluopyram fluazi nam and carbendazim applied under the same concentration Taken together benzovindiflupyr had high activity against C acutatumand stable field efficacy for pepper anthrancnose thus it could be used as analternativefungicidewithhighpotential Keywords Colletotrichumacutatum benzovindiflupyr inhibitoryactivity anthracnose controlefficacy 我 国 是 世 界 上 辣 椒 第 二 生 产 国 和 出 口 国 其 中 山 东 省 作 为 我 国 辣 椒 主 要 产 地 之 一 约 占 全 国 产 量 的10 王 少 立 等 2017 随 着 市 场 对 辣 椒 需 求 量 增加 辣椒种植规模不断扩大 而随着多年集中栽培 和 气 候 变 化 病 害 逐 年 增 加 辣 椒 炭 疽 病 是 由 半 知 菌 亚 门 炭 疽 菌 属 Colletotrichum spp 邹 学 校 等 2020 引起的世界性真菌病害 主要在露地辣椒生长 的中后期发生 主要危害辣椒和叶片 特别是成熟期 辣 椒 高 杨 杨 等 2017a 每 年7 9 月 山 东 省 辣 椒 正 值 结 果 期 高 温 多 雨 的 气 候 条 件 加 重 辣 椒 炭 疽 病 的 发 生 和 流 行 减 产 率 达50 Gao et al 2021 严 重威胁辣椒产业的发展 化学药剂是仍防治辣椒炭 疽 病 最 有 效 的 方 法 之 一 然 而 在 实 际 生 产 中 多 菌 灵 百菌清 代森锰锌和咪鲜胺等登记药剂对炭疽病 的防效下降 夏花等 2012 其中炭疽病主要病原菌 胶 孢 炭 疽 菌C gloeosporioides 已 对 苯 并 咪 唑 类 杀 菌 剂产生抗性 邓维萍等 2013 因此 寻找活性更高 的替代杀菌剂迫在眉睫 第3 代 新 型 琥 珀 酸 脱 氢 酶 抑 制 剂 succinate de hydrogenase inhibitor SDHI 类 杀 菌 剂 具 有 活 性 高 抑 菌 谱 广 的 优 点 已 被 广 泛 用 于 防 治 灰 霉 病 和 白 粉 病 等 真 菌 病 害 Ishiietal 2016 研 究 发 现 各 种 新 型 SDHI 类 杀 菌 剂 对 炭 疽 菌 的 抑 制 活 性 差 异 明 显 除 苯 并 烯 氟 菌 唑 外 其 他SDHI 类 杀 菌 剂 对 炭 疽 菌 的 抑 制 活 性 较 低 苯 并 烯 氟 菌 唑 是 由 先 正 达 公 司 于 2012 年 开 发 的 一 种SDHI 类 杀 菌 剂 Mello et al 2021 其 作 用 于 病 原 菌 线 粒 体 呼 吸 链 复 合 物 通 过 影 响 电 子 传 递 来 阻 碍 能 量 代 谢 进 而 发 挥 抑 菌 作 用 Hagerty et al 2021 Samaras et al 2021 目 前 该 药 已 在 巴 西 法 国 和 巴 拉 圭 等 国 家 登 记 用 于 防 治 大 豆 锈 病 和 小 麦 叶 枯 病 等 作 物 病 害 Mello et al 2021 据 报 道 苯 并 烯 氟 菌 唑 对 灰 霉 病 He et al 2018 菌 核 病 Huangetal 2019 白 粉 病 及 叶 锈 病 杜庆志等 2020 均有较好的防效和应用潜力 被认 为 是SDHI 类 杀 菌 剂 中 最 具 潜 力 的 品 种 之 一 目 前 未 见 苯 并 烯 氟 菌 唑 防 治 辣 椒 炭 疽 病 的 报 道 为明确苯并烯氟菌唑对辣椒炭疽病病原菌的抑 制 活 性 2018 2019 年 自 山 东 省 济 宁 菏 泽 德 州 和 泰 安4 个 市 露 天 辣 椒 产 区 采 集 感 染 辣 椒 炭 疽 病 的 辣 椒 经 单 孢 分 离 法 共 分 离 纯 化 获 得108 株 辣 椒 炭 疽 病 病 原 菌 于 室 内 测 定 苯 并 烯 氟 菌 唑 对 其 菌 丝 生 长 和 孢 子 萌 发 的 抑 制 作 用 并 确 定 其 对 苯 并 烯 氟 菌 唑 的 敏 感 基 线 同 时 测 定 该 药 剂 对 辣 椒 炭 疽 病 的 相 对 治 疗 防 效 相 对 保 护 防 效 室 内 相 对 防 效 及 田 间 相 对 防 效 以 期 为 该 药 剂 的 进 一 步 推 广 应 用 提 供 依 据 1 材料与方法 1 1 材料 供 试 菌 株 植 物 和 土 壤 2018 2019 年 自 山 东 省济宁 菏泽 德州和泰安市露地辣椒主产区采集感 染 辣 椒 炭 疽 病 的 辣 椒 病 果 采 用 单 孢 分 离 法 对 其 进 行 分 离 纯 化 Shastrietal 2020 共 得 到108 株 辣 椒 炭 疽 病 菌 其 中 济 宁 市 获 得30 株 菌 株 编 号 分 别 为 济 宁1 济 宁30 菏 泽 市 获 得25 株 菌 株 编 号 分 别 为 菏 泽1 菏 泽25 泰 安 市 获 得25 株 菌 株 编 号 分 别 为 泰 安1 泰 安25 德 州 市 获 得28 株 菌 株 编 号 分 别 为 德 州1 德 州28 通 过 形 态 学 特 征 和 分 子 生 物 学 特 征 将108 株 菌 株 均 鉴 定 为 尖 孢 炭 疽 菌C acutatum 高 杨 杨 等 2017b 将 其 接 种 于 马 铃 薯 葡 萄 糖 琼 脂 potatodextroseagar PDA 培 养 基 斜 面 上 于4 保 存备用 保护和治疗试验中辣椒品种为朝天椒天宇 3 号 种 子 购 于 纯 丰 种 业 有 限 公 司 露 天 种 植 于 山 东 农业大学试验基地 选择同一时期 大小一致且未喷 施 过 药 剂 的 辣 椒 行 试 验 室 内 防 效 试 验 所 用 品 种 为 线 椒6 号 由山东省 德州市超 丰种业提 供 于室内种 植 常 规 管 理 至 成 株 期 时 供 试 室 内 防 效 试 验 中 黄 壤 土 由 山 东 农 业 大 学 试 验 基 地 提 供 基 质 土 和 有 机 质 购自新洋丰农业科技股份有限公司 培 养 基 PDA 培 养 基 成 分 为 马 铃 薯200 g 葡 萄 糖20 g 琼 脂 粉20 g 去 离 子 水1 L 水 琼 脂 water agar WA 培 养 基 成 分 为 葡 萄 糖20 g 琼 脂 粉20 g 去离子水1L 药 剂 96 苯 并 烯 氟 菌 唑 benzovindiflupyr 原 药 150 g L 苯 并 烯 氟 菌 唑 乳 油 先 正 达 南 通 作 物 保 3 期 王爱萍等 苯并烯氟菌唑对尖孢炭疽菌的毒力及对其所致辣椒炭疽病的防效 831护 有 限 公 司 41 7 氟 吡 菌 酰 胺 fluopyram 悬 浮 剂 拜 耳 股 份 有 限 公 司 500g L 氟 啶 胺 fluazinam 悬 浮 剂 江 阴 苏 利 化 学 股 份 有 限 公 司 50 多 菌 灵 car bendazim 可湿性粉剂 上海悦联化工有限公司 试 剂 及 仪 器 二 甲 基 亚 砜 dimethyl sulfoxide DMSO 天 津 市 津 东 天 正 精 细 化 学 试 剂 厂 其 他 试 剂 均 为 国 产 分 析 纯 Olympus IX 71 光 学 电 子 显 微 镜 日 本 奥 林 巴 斯 公 司 手 持 喷 雾 器K901 辉 虹 科 技 有 限 公 司 SPX 型 智 能 生 化 培 养 箱 宁 波 江 南 仪 器 厂 WS 16 农 用 背 负 式 喷 雾 器 山 东 卫 士 植 保 机 械 有 限公司 1 2 方法 1 2 1 苯并烯氟菌唑对菌丝生长的抑制作用 采 用 菌 丝 生 长 速 率 法 Forcelini et al 2016 测 定 苯 并 烯 氟 菌 唑 对108 株 尖 孢 炭 疽 菌 菌 株 菌 丝 生 长 的 抑 制 活 性 用DMSO 将96 苯 并 烯 氟 菌 唑 原 药 溶 解 配 制 成 浓 度 为600 g mL 的 母 液 用 含0 1 吐 温 80 的 灭 菌 去 离 子 水 将 其 稀 释 成 系 列 浓 度 为 0 5 1 5 10 和50 g mL 的 药 液 与 加 热 后 冷 却 至 50 左 右 的PDA 培 养 基 混 合 制 成 含 苯 并 烯 氟 菌 唑 的PDA 平 板 含 苯 并 烯 氟 菌 唑 质 量 浓 度 分 别 为 0 05 0 1 0 5 1 和5 g mL 用 直 径 为8 mm 的 打 孔 器在培养7d 后的供试菌株菌落边缘打取菌饼 将其 接 种 到 含 药PDA 平 板 中 央 以 加 入 等 体 积DMSO 为 溶剂对照 以加入灭菌去离子水为空白对照 每个处 理重复3 次 接种后置于25 黑暗培养6d 采用十 字 交 叉 法 测 量 菌 落 直 径 计 算 菌 丝 生 长 抑 制 率 根 据药剂浓度对数值与菌丝生长抑制率之间的关系计 算 有 效 抑 制 中 浓 度EC 50 菌 丝 生 长 抑 制 率 溶 剂 对 照 组 菌 落 直 径 处 理 组 菌 落 直 径 对 照 组 菌 落 直 径 8 100 1 2 2 苯并烯氟菌唑对孢子萌发的抑制作用 采 用 孢 子 萌 发 法 Amiri et al 2013 测 定 苯 并 烯 氟 菌 唑 对108 株 尖 孢 炭 疽 菌 菌 株 分 生 孢 子 萌 发 的 抑 制 活 性 将 供 试 菌 株 置 于 生 化 培 养 箱 中25 黑 暗 培 养7 d 用 灭 菌 去 离 子 水 洗 下 孢 子 双 层 纱 布 过 滤去除菌丝 用振荡器充分摇匀后获得孢子悬浮液 在 显 微 镜 下 调 节 孢 子 浓 度 至1 10 5 个 L 按 照 含 苯 并 烯 氟 菌 唑 的PDA 平 板 方 法 配 制 含 苯 并 烯 氟 菌 唑 的WA 平 板 含 苯 并 烯 氟 菌 唑 质 量 浓 度 分 别 为 0 012 0 024 0 048 0 096 和0 192 g mL 以 加 入 等 体 积DMSO 为 溶 剂 对 照 以 加 入 灭 菌 去 离 子 水 为 空 白 对 照 每 个 处 理 重 复3 次 取60 L 孢 子 悬 浮 液 均 匀 涂 布 于WA 平 板 上 置 于 生 化 培 养 箱 中25 黑 暗 培 养8h 于 显 微 镜 下 观 察 分 生 孢 子 萌 发 情 况 每 个 平 板 随 机 调 查3 个 视 野 3 个 视 野 共 观 察 分 生 孢 子 数 不 少 于120 个 统 计 孢 子 总 数 及 孢 子 萌 发 数 计 算 孢 子萌发抑制率 根据药剂浓度对数值与孢子萌发抑 制 率 之 间 的 关 系 计 算 有 效 抑 制 中 浓 度EC 50 孢 子 萌 发 抑 制 率 溶 剂 对 照 组 孢 子 萌 发 率 处 理 组 孢 子 萌 发率 溶剂对照组孢子萌发率 100 1 2 3 尖孢炭疽菌对苯并烯氟菌唑的敏感基线 参照姚锦爱等 2022 方法建立敏感基线 将供 试 菌 株 对 苯 并 烯 氟 菌 唑 的EC 50 由 高 到 低 划 分 成7 个 区 间 组 距 为EC 50 最 大 值 与EC 50 最 小 值 的 差 值 除 以 7 统 计 不 同 区 间 各 菌 株EC 50 的 出 现 频 率 绘 制 尖 孢 炭 疽 病 菌 菌 株 对 苯 并 烯 氟 菌 唑 的 敏 感 性 频 率 分 布 图 采 用SAS9 3 软 件 对 其 分 布 进 行Shapiro Wilk 正 态性检验 当供试菌株对苯并烯氟菌唑的敏感性频 率 分 布 近 似 呈 正 态 分 布 时 其 平 均EC 50 可 作 为 尖 孢 炭疽菌对该药剂的敏感基线 1 2 4 苯并烯氟菌唑的保护防效和治疗防效 传 统 药 剂 多 菌 灵 杀 菌 谱 广 对 多 种 作 物 上 由 真 菌引起的病害均有防效 属于在登药剂 但由于时间 跨 度 稍 大 目 前 单 剂 登 记 失 效 现 仅 有 混 剂 在 登 氟 啶胺登记用于防治辣椒炭疽病 效果稳定 目前尚未 发 现 辣 椒 对 其 产 生 抗 药 性 氟 啶 胺 登 记 剂 量 为225 262 5 g a i hm 2 氟 吡 菌 酰 胺 同 属 于SDHI 类 杀 菌 剂 对多种病原菌有很好的抑制活性 虽未登记用于 防 控 辣 椒 炭 疽 病 但 与 苯 并 烯 氟 菌 唑 同 属 于SDHI 类药剂 两者作用机理相同 但两者对辣椒炭疽病的 防 效 差 异 尚 不 清 楚 因 此 本 研 究 选 择 多 菌 灵 氟 啶 胺和氟吡菌酰胺为对照药剂进行试验 参照中国农 药 信 息 网 上 公 布 的 氟 啶 胺 登 记 剂 量 设 定 氟 啶 胺 剂 量 为240g a i hm 2 参 照 苯 并 烯 氟 菌 唑 对 尖 孢 炭 疽 菌 的 毒 力 结 果 及 对 照 药 剂 氟 啶 胺 的 剂 量 设 定 苯 并 烯 氟 菌 唑 剂 量 分 别 为60 120 和240 g a i hm 2 试 验 共7 个 处 理 即 剂 量 分 别 为60 120 和240g a i hm 2 的 苯 并 烯 氟 菌 唑 240g a i hm 2 氟 吡 菌 酰 胺 对 照 药 剂 240g a i hm 2 氟 啶 胺 对 照 药 剂 240g a i hm 2 多菌灵 对照药剂 和清水处理 空白对照 参照金丽华等 2007 方法测定苯并烯氟菌唑对 辣 椒 炭 疽 病 的 保 护 防 效 从 未 施 药 的 朝 天 椒 天 宇3 号 辣椒植株上摘取大小一致 长势优良的辣椒 用无菌 去离子水清洗干净 在室温下自然晾干 放到含有浸 湿 滤 纸 的 长16 cm 宽10 cm 高 6 cm 的 保 鲜 盒 中 选 择 致 病 力 稳 定 的 济 宁11 作 为 接 种 菌 株 使 用 手 持 喷 雾 器K901 将 上 述 药 剂 均 匀 喷 施 到 辣 椒 表 面 形 832 植 物 保 护 学 报 50 卷成 一 层 药 膜 每 个 辣 椒 喷 液 量 为15 mL 喷 施24 h 后 用 灭 菌 接 菌 针 在 辣 椒 表 面 刺1 个 深 度 为1 mm 的 伤 口 取10 L 浓 度 为1 10 5 个 L 的 孢 子 悬 浮 液 滴 到 伤 口 处 将 其 置 于 温 度25 光 周 期12 L 12 D 相 对 湿 度85 的 生 化 培 养 箱 中 培 养7 d 测 量 病 斑 直 径 每 个 处 理20 个 辣 椒 试 验 重 复3 次 计 算 各 处 理 的 相 对 保 护 防 效 相 对 保 护 防 效 空 白 对 照 病 斑 直径 处理病斑直径 空白对照病斑直径 100 参照金丽华等 2007 方法测定苯并烯氟菌唑对 辣椒炭疽病的相对治疗防效 方法同相对保护防效 仅 是 先 接 种 孢 子 悬 浮 液 24 h 后 再 喷 施 药 液 计 算 各处理的相对治疗防效 公式同上 1 2 5 苯并烯氟菌唑对辣椒炭疽病的室内防效测定 采 用 叶 面 喷 雾 法 郭 明 程 等 2013 进 行 室 内 防 效 测 定 并 适 当 调 整 2019 年4 月 在 长5cm 宽5cm 高7cm 的 育 苗 盆 中 播 种 易 感 辣 椒 品 种 线 椒6 号 土 壤 为 育 苗 基 质 土 每 盆 种 植1 株 将 育 苗 盘 置 于 山 东 农 业 大 学 温 室 内 采 用 常 规 管 理 待 种 子 萌 发 长 至2 片 真 叶 后 选 取 长 势 整 齐 一 致 的 植 株 移 栽 至 长9 cm 宽9cm 高9cm 的 花 盆 中 黄 壤 土 和 有 机 质 按 体 积 比3 1 混 合 作 为 土 壤 每 盆 种 植1 株 培 养12 周 后 待 辣 椒 苗 长 至 成 株 期 时 进 行 试 验 试 验 共 设7 个 处 理 7 个 处 理 同1 2 4 每 个 处 理10 株 试 验 重 复3 次 共210 株 选 择 对 试 验 药 剂 均 表 现 敏 感 的 济 宁11 菌 株 作 为 接 种 菌 株 使 用 手 持 喷 雾 器K901 将 浓 度 为 1 10 5 个 L 的 孢 子 悬 浮 液 喷 雾 接 种 到 辣 椒 苗 上 每 株 接 种5mL 将 接 种 后 的 辣 椒 苗 置 于 温 度 25 2 相 对 湿 度 95 的 黑 暗 条 件 下 诱 导 发 病 24h 后 使 用 手 持 喷 雾 器K901 将 不 同 处 理 的 药 剂 喷 洒 在 辣 椒 苗 上 每 株 喷 施 约25 mL 喷 雾 量 以 叶 片 滴 水 为 准 施 药7d 后 对 辣 椒 苗 的 发 病 情 况 进 行 调 查 参 照 农 药 田 间 药 效 试 验 准 则 一 杀 菌 剂 防 治 辣 椒 炭 疽 病 GB T17980 33 2000 对 发 病 情 况 进 行 分 级 计 算 各 处 理 的 病 情 指 数 和 相 对 防 效 病 情 指 数 100 各 级 病 叶 数 相 对 级 数 值 调 查 总 叶 数 9 相 对 防 效 100 对 照 病 情 指 数 处 理 病 情 指 数 对 照 病情指数 1 2 6 苯并烯氟菌唑对辣椒炭疽病的田间防效测定 根 据 农 药 田 间 药 效 试 验 准 则 一 杀 菌 剂 防 治 辣 椒 炭 疽 病 GB T17980 33 2000 标 准 于2019 年 7 月 分 别 在 山 东 省 济 宁 市 金 乡 县 鱼 山 镇 北 李 村 和 山 东 省 泰 安 市 岱 岳 区 大 汶 口 镇 东 大 吴 村 进 行 田 间 试 验 试 验 地 每 年 自 然 发 生 辣 椒 炭 疽 病 且 未 使 用 过 供 试 药 剂 当 年3 月 种 植 线 椒6 号 试 验 共 设7 个 处 理 处 理 同1 2 4 试 验 采 用 完 全 随 机 区 组 设 计 每 个 处 理3 个 小 区 即3 个 重 复 每 个 小 区 面 积30m 2 小 区 之 间 设 置50cm 保 护 行 于 发 病 初 期 开 始 第1 次 用 药 济 宁 市 和 泰 安 市 的 施 药 时 间 分 别 是7 月10 日 和7 月12 日 此 时 辣 椒 正 值 结 果 期 使 用WS 16 农 用 背 负 式 喷 雾 器 对 辣 椒 全 株 均 匀 喷 药 药 液 量 为 600 L hm 2 以 药 液 在 辣 椒 上 呈 现 露 水 状 为 宜 14 d 后 进 行 第2 次 用 药 分 别 在 施 药 前 和 末 次 施 药 后 14d 调 查 辣 椒 病 斑 面 积 每 小 区 随 机 取5 个 样 点 每 点 调 查2 株 共 计10 株 每 株 调 查 全 部 辣 椒 根 据 病 斑 面 积 按 照 上 述 标 准 进 行 病 情 分 级 计 算 病 情 指 数 和相对防效 方法同1 2 6 1 3 数据分析 采 用SPSS16 0 软 件 对 数 据 进 行 统 计 分 析 应 用 Tukey 法进行差异显著性检验 2 结果与分析 2 1 苯并烯氟菌唑对尖孢炭疽菌的抑制作用 苯并烯氟菌唑对尖孢炭疽菌菌丝生长和孢子萌 发 均 有 较 强 的 抑 制 作 用 随 着 苯 并 烯 氟 菌 唑 浓 度 的 升 高 抑 制 率 显 著 增 加 P 0 05 图1 浓 度 为5 g mL 的 苯 并 烯 氟 菌 唑 处 理 后 尖 孢 炭 疽 菌 菌 丝 生 长 抑 制 率 达 到 最 高 为90 41 以 上 图1 A 菌 丝 末 端 扭 曲 分 枝 较 对 照 菌 丝 增 多 图2 A B 浓 度 为0 192 g mL 的 苯 并 烯 氟 菌 唑 处 理 后 98 67 尖 孢 炭 疽 菌 菌 株 的 孢 子 萌 发 受 到 抑 制 图1 B 1 33 尖 孢 炭 疽 菌 菌 株 的 孢 子 萌 发 但 萌 发 后 的 芽 管 膨 大 变 粗 且 生 长 受 到 抑制 芽管长度明显短于对照处理 图2 C D 2 2 不同种群对苯并烯氟菌唑的敏感性差异 山 东 省4 个 尖 孢 炭 疽 菌 种 群 菌 丝 生 长 对 苯 并 烯 氟 菌 唑 均 表 现 为 敏 感 但4 个 种 群 对 苯 并 烯 氟 菌 唑 的 敏 感 性 之 间 存 在 差 异 其 中 泰 安 市 尖 孢 炭 疽 菌 种 群 的 敏 感 性 最 低 EC 50 为1 116 g mL 但 与 菏 泽 市 尖 孢 炭 疽 菌 种 群 的 敏 感 性 差 异 不 显 著 济 宁 市 和 德 州 市 尖 孢 炭 疽 菌 种 群 的 敏 感 性 较 高 EC 50 分 别 为 0 589 g mL 和0 641 g mL 显 著 低 于 其 他2 个 种 群 P 0 05 表1 尽 管 不 同 种 群 对 苯 并 烯 氟 菌 唑 的 敏 感 性 存 在 差 异 但 未 见 敏 感 性 明 显 下 降 的 菌 株 济 宁 菏泽 泰安和德州市尖孢炭疽菌种群孢子萌发对 苯 并 烯 氟 菌 唑 的 敏 感 性 无 显 著 差 异 EC 50 分 别 为 0 048 0 048 0 052 和0 042 g mL 表 明 苯 并 烯 氟 菌 唑对尖孢炭疽菌孢子萌发的抑制活性与地理来源无 关 表1 3 期 王爱萍等 苯并烯氟菌唑对尖孢炭疽菌的毒力及对其所致辣椒炭疽病的防效 833图1 苯并烯氟菌唑对尖孢炭疽菌菌丝生长 A 及孢子萌发 B 的抑制率 Fig 1 Inhibitionrateofmycelialgrowth A andsporegermination B ofColletotrichumacutatumbybenzovindiflupyr 图 中 数 据 为 平 均 数 标 准 误 不 同 小 写 字 母 表 示 经Tukey 法 检 验 差 异 显 著 P 0 05 Dataaremean SE Differentlower caselettersindicatesignificantdifferencebyTukeytest P 0 05 A 对 照 处 理 的 菌 丝 B 浓 度 为5 g mL 苯 并 烯 氟 菌 唑 处 理7 d 的 菌 丝 C 对 照 处 理 的 分 生 孢 子 D 浓 度 为 0 192 g mL 苯 并 烯 氟 菌 唑 处 理8h 的 分 生 孢 子 A MyceliauntreatedwithCK B myceliatreatedwith5 g mLben zovindiflupyrfor7d C conidiauntreatedwithCK D conidiatreatedwith0 192 g mLbenzovindiflupyrfor8h 图2 苯并烯氟菌唑对尖孢炭疽菌菌丝形态和孢子萌发的影响 Fig 2 EffectsofbenzovindiflupyronthemycelialmorphologyandsporegerminationofColletotrichumacutatum 表1 苯并烯氟菌唑对山东省4 个市分离的尖孢炭疽菌菌丝生长和孢子萌发的抑制活性 Table1 Inhibitoryactivitiesofbenzovindiflupyragainstmycelialgrowthandsporegerminationof ColletotrichumacutatumisolatedfromfourcitiesinShandongProvince 采集地点 Collectionsite 济宁市JiningCity 菏泽市HezeCity 泰安市Tai anCity 德州市DezhouCity 菌株数 No of strains 30 25 25 28 菌丝生长Mycelialgrowth EC 50 范围 RangeofEC 50 g mL 0 084 1 317 0 196 3 150 0 133 3 976 0 073 3 398 EC 50 平均数 MeanofEC 50 g mL 0 589 0 058b 0 827 0 113ab 1 116 0 199a 0 641 0 119b 孢子萌发Sporegermination EC 50 范围 RangeofEC 50 g mL 0 005 0 140 0 017 0 140 0 005 0 196 0 005 0 081 EC 50 平均数 MeanofEC 50 g mL 0 048 0 005a 0 048 0 006a 0 052 0 008a 0 042 0 004a 表 中 数 据 为 平 均 数 标 准 误 同 列 不 同 小 写 字 母 表 示 经Tukey 法 检 验 差 异 显 著 P 0 05 Dataaremean SE Differentlet tersinthesamecolumnindicatesignificantdifferencebyTukeytest P0 050 图3 A 因 此 0 780 g mL 可 作 为 尖 孢 炭 疽 菌 菌 丝 生长对苯并烯氟菌唑的敏感基线用于抗性监测 苯 并 烯 氟 菌 唑 对108 株 尖 孢 炭 疽 菌 菌 株 孢 子 萌 发 的 EC 50 介 于 0 005 0 196 g mL 之 间 平 均 EC 50 为 0 048 g mL 且108 株 尖 孢 炭 疽 菌 菌 株 孢 子 萌 发 对 苯 并 烯 氟 菌 唑 的 敏 感 性 频 率 呈 单 峰 曲 线 分 布 经 Shapiro Wilk 法 分 析 符 合 正 态 分 布 P 0 280 0 050 图3 B 因 此 0 048 g mL 可 以 作 为 尖 孢 炭 疽 菌 孢 子萌发对苯并烯氟菌唑的敏感基线用于抗性监测 2 4 苯并烯氟菌唑的保护防效和治疗防效 随 着 剂 量 增 加 苯 并 烯 氟 菌 唑 对 辣 椒 炭 疽 病 的 相 对 保 护 防 效 和 相 对 治 疗 防 效 均 显 著 上 升 相 对 保 834 植 物 保 护 学 报 50 卷护 防 效 分 别 为53 32 64 99 和85 64 相 对 治 疗 防 效 分 别 为43 76 51 60 和74 96 且 同 剂 量 下 相对保护防效均高于相对治疗防效 其中剂量为 240 g a i hm 2 苯 并 烯 氟 菌 唑 对 辣 椒 炭 疽 病 的 保 护 作用及治疗作用分别显著优于对照药剂氟吡菌酰胺 的 保 护 作 用 和 治 疗 作 用 P 0 05 也 分 别 优 于 对 照 药 剂 氟 啶 胺 和 多 菌 灵 的 保 护 作 用 和 治 疗 作 用 但 差 异不显著 表2 图3 尖孢炭疽菌菌丝生长 A 及孢子萌发 B 对苯并烯氟菌唑的敏感性频率分布 Fig 3 Distributionofsensitivityfrequencyofmycelialgrowthassay A andsporegermination B of Colletotrichumacutatumtobenzovindiflupyr 表2 不同药剂对辣椒炭疽病的相对保护防效和相对治疗防效 Table2 Relativeprotectiveandcurativeactivitiesoffungicidesagainstpepperanthracnose 处理 Treatment 苯并烯氟菌 Benzovindiflupyr 氟吡菌酰胺Fluopyram 氟啶胺Fluazinam 多菌灵Carbendazim 对照CK 剂量 Dose g a i hm 2 60 120 240 240 240 240 保护作用Protectiveeffect 病斑直径 Lesiondiameter mm 8 67 2 08b 6 50 2 18bc 2 67 1 53d 8 77 0 91b 4 63 0 58cd 5 33 0 58bcd 18 57 0 68a 相对防效 Relativeefficacy 53 32 3 47b 64 99 3 78ab 85 64 4 75a 52 78 2 82b 75 04 1 80a 71 27 1 80ab 治疗作用Curativeeffect 病斑直径 Lesiondiameter mm 10 70 0 91b 9 33 0 73bc 5 67 0 41c 10 20 1 30b 7 20 0 62bc 7 17 1 17bc 19 23 0 23a 相对防效 Relativeefficacy 43 76 4 58b 51 60 3 76b 74 96 2 67a 46 97 6 76b 64 23 3 27ab 64 40 6 06ab 表 中 数 据 为 平 均 数 标 准 误 同 列 不 同 小 写 字 母 表 示 经Tukey 法 检 验 差 异 显 著 P 0 05 Data are mean SE Different lowercas