不同温度下褪黑素处理对“阳光玫瑰”葡萄采后品质的影响.pdf

中国农业科学 2022 55 7 1411 1422 Scientia Agricultura Sinica doi 10 3864 j issn 0578 1752 2022 07 012 收稿日期 2021 07 01 接受日期 2021 10 09 基金项目 国家重点研发计划 2018YFD1000200 山东省农业良种工程项目 2020LZGC008 联系方式 吕馨宁 E mail 1713882558 通信作者姚玉新 E mail yaoyx 开放科学 资源服务 标识码 OSID 不同温度下褪黑素处理对 阳光玫瑰 葡萄采后品 质的影响 吕馨宁 王玥 贾润普 王胜男 姚玉新 山东农业大学园艺科学与工程学院 作物生物学国家重点实验室 山东泰安 271018 摘要 目的 冷藏是提高葡萄耐储性 延长货架期的有效方法 但低温会降低糖酸和香气含量等果实品质 本研究旨在测 定不同温度条件下褪黑素处理对 阳光玫瑰 葡萄储藏期品质的影响 并探讨其调控储藏品质的代谢基础 方法 设置室 温和 1 两个储藏温度 葡萄采后利 用5和50 mol L 1 褪黑素浸果 于不同储藏期取样测定果实品质指标 利用 HPLC MS 测 定褪黑素含量 利用 GC MS 测定香气组分及含量 利用毛细管电 泳测定可溶性糖和有机酸含量 利用质构仪测定果实质地 利用广靶代谢组学分析褪黑素处理导致的差异代谢物 结果 外源褪黑素处理能显著提高葡萄果实褪黑素含量 50 mol L 1 处理效果显著高于 5 mol L 1 并且低温能大幅提高褪黑素处理效果 低温 50 mol L 1 褪黑素处理的果实中褪黑素含量为 室温同浓度处理的 2 6 倍 低温下 果实失水率降低 在室温和低温储藏下 褪黑素对果实失水率 果皮硬度和果肉硬度 未产生显著影响 室温条件下 5 mol L 1 褪黑素处理显著提高了葡萄糖和果糖含量 而 50 mol L 1 褪黑素产生了相反的 结果 与室温储藏相比 低温储藏显著降低了果实糖含量 低温条件下 与对照相比 5 mol L 1 和 50 mol L 1 褪黑素处 理均显著提高了可溶性糖含量 储藏 40 d 时增幅在 19 2 以上 与室温相比 低 温提高了可滴定酸尤其是苹 果酸含量 低 温条件下 两种浓度褪黑素处理较对 照显著降低了可滴定酸尤其是苹 果酸含量 苹果酸含量降幅超过 53 5 对酒石酸含 量影响较小 与室温储藏相比 低温储藏大幅度降低了未经褪黑素处理的果实香气含量 但是 褪黑素处理能有效增加低 温条件下果实香气总量及香气组分含量 且以 5 mol L 1 褪黑素处理效果较好 在处理后 30 和 40 d 较低温对照香气总量 增幅分别达 2 12 和 1 6 倍 同时显著增加了反式 2 己烯醛 里那醇 2 4 二叔丁基苯酚等特征香气含量 低温下对照和 5 mol L 1 褪黑素处理的果实代谢组学分析表明 232 种代谢物含量存在差异 涉及的主要代谢途径包括氨基酸生化合成 氨酰基 tRNA 生化合成 精氨酸生化合成 丙氨酸 天冬氨酸和谷氨酸代谢及苯丙胺代谢 结论 与室温储藏相比 低 温冷藏降低了部分糖和绝大多数香气物质的含量 褪黑素处理能够显著提高冷藏果实的可溶性糖含量 降低有机酸水平 大幅提高香气水平 能有效提高果实品质 其中 5 mol L 1 褪黑素处理效果更明显 褪黑素主要通过影响氨基酸代谢提高 香气含量 关键词 葡萄 褪黑素 冷藏 果实品质 代谢组 Effects of Melatonin Treatment on Quality of Stored Shine Muscat Grapes Under Different Storage Temperatures L XinNing WANG Yue JIA RunPu WANG ShengNan YAO YuXin College of Horticultural Science and Engineering Shandong Agricultural University State Key Laboratory of Crop Biology Tai an 271018 Shandong 1412 中 国 农 业 科 学 55卷 Abstract Objective Cold storage is a very effective way to improve berry storage ability and to extend shelf life However cold storage decreases fruit quality including sugars acids and aroma The paper was aimed to determine the effects of melatonin treatment on berry quality of Shine Muscat under different storage temperatures and to investigate the melatonin induced changes of metabolites involved in quality ation The berries were treated via soaking with 5 and 50 mol L 1 melatonin and stored at room temperature or 1 The berries at different days after storage were collected for quality analysis Melatonin and aroma were determined by using HPLC MS and GC MS respectively Capillary electrophoresis was used to detect soluble sugars and organic acids The wide target metabolomics was employed to analyze the differentially accumulated metabolites Result The exogenous melatonin treatment significantly increased melatonin content of the berries and 50 mol L 1 melatonin was more effective than 5 mol L 1 melatonin Additionally the melatonin treatment increased accumulation of melatonin more effectively at low temperature than it did at room temperature e g the melatonin content of the berries treated with 50 mol L 1 melatonin at low temperature was 2 6 folds higher than that at room temperature The water loss rate of berries decreased at low temperature The melatonin treatment did not significantly affect water loss rate skin and pulp firmness At room temperature 5 mol L 1 melatonin significantly increased content of glucose and fructose however 50 mol L 1 melatonin led to the contrary results The cold storage produced negative effects on soluble sugars in contrast these melatonin treatments increased content of soluble sugars at low temperature and the increments exceeded 19 2 at 40 days after cold storage The cold storage increased titratable acidity and particularly malic acid compared to storage at room temperature In contrast the melatonin significantly decreased titratable acidity and particularly malic acid of the berries with more than 53 5 decrement compared with the non treated control under cold storage Notably the berry aroma was largely reduced by cold storage and melatonin and particularly 5 mol L 1 melatonin largely increased amount of total aroma and aroma components The berries treated with 5 mol L 1 melatonin accumulated 2 12 and 1 6 fold higher aroma than the control berries at 30 and 40 days after cold storage respectively Additionally the melatonin increased the amount of characteristic aromas including E 2 hnal linalool and 2 4 Di tert butylphenol Based on the wide target metabolomics analysis 232 differentially accumulated metabolites in the berries treated with 5 mol L 1 melatonin were identified compared with the control berries under cold storage which were primarily related to biosynthesis of amino acids aminoacyl tRNA biosynthesis arginine biosynthesis alanine aspartate and glutamate metabolism and phenylalanine metabolism Conclusion Compared with storage at room temperature the cold storage decreased content of part of the soluble sugars and most of aroma components The berries treated with melatonin accumulated significantly higher soluble sugars and aroma components and lower organic acids thereby exhibited improved berry quality while 5 mol L 1 melatonin was more effective Additionally the increased aroma amount might be dominantly associated with the changed amino acid metabolism in the berries treated with melatonin under cold storage Key words grape melatonin cold storage berry quality widely targeted metabolomics 0 引言 研究意义 葡萄是世界四大果树之一 因其富 含维生素 花青素 类黄酮等成分 深受消费者喜爱 葡萄作为浆果 耐储性较差 冷藏是延长其货架期的 必要手段 冷藏会降低果实糖度和香气等品质成分 从而降低果实品质 褪黑素 N 乙酰基 5 甲氧基色胺 作为一种新的环境友好型生长调节物质 在维持冷藏 葡萄品质上的效果尚不清楚 研究褪黑素处理对葡萄 采后品质 尤其是冷藏 的影响 对于揭示褪黑素调 控果实衰老的生物学功能具有重要意义 同时也为葡 萄冷藏品质调控提供技术支撑 前人研究进展 葡 萄果实品质主要由初生品质 糖 酸等 和次生品质 多酚 香气等 组成 葡萄属于非呼吸跃变型果实 尽管目前非跃变型果实成熟机制尚不清楚 但研究表 明ABA 乙烯 褪黑素等信号分子参与了葡萄果实成 熟调控和品质形成 1 3 HERN NDEZ RUIZ等 4 首次 发现褪黑素具有植物生长调节剂的作用 作为生长调 节剂 褪黑素在提升果实鲜食和储藏品质 调控果实 成熟方面均有效果 5 褪黑素能提高 美乐 葡萄的 次生代谢品质成分 包括花青素 总酚及其他黄酮类 物质 6 7 褪黑素能提高梨果实可溶性糖 尤其是蔗 糖和山梨醇含量 8 褪黑素能增加草莓果实总酚及花 青素含量 9 保持芒果新鲜度 改善其贮藏品质 10 推迟荔枝果实总花青素 总黄酮和总酚物质含量的下 降 11 褪黑素也能推迟香蕉 草莓和桃果实的采后成 熟 12 尤其是在低温条件下 褪黑素能延迟猕猴桃 后熟衰老 13 延长李子货架期和冷藏品质 14 有效保 持水蜜桃储藏期的感官品质 15 并且 褪黑素能有效 提高储藏期荔枝果实的冷抗性 16 综上 褪黑素调控 果实代谢的主要效应表现为加速果实成熟 推迟果实 采后衰老 就机制而言 褪黑素可能主要通过与其他 7期 吕馨宁等 不同温度下褪黑素处理对 阳光玫瑰 葡萄采后品质的影响 1413 激素互作来调控果实成熟和衰老 包括乙烯和 ABA 12 18 本研究切入点 阳光玫瑰 葡萄为玫 瑰香型 硬肉 晚熟品种 适合冷藏储存 目前少量 研究表明外源褪黑素处理能推迟冷藏期果实品质下 降 为本研究提供了借鉴 但褪黑素对葡萄冷藏期品 质的影响亟待研究与评价 拟解决的关键问题 通 过测定不同浓度外源褪黑素处理对葡萄果实大小 失 水率 质地 糖酸含量和果实香气的影响 确定褪黑 素在低温储藏过程中主要影响的品质指标 通过测定 室温和低温下褪黑素对以上品质指标的影响 明确褪 黑素和低温对储藏品质的交叉效应 1 材料与方法 1 1 试验材料及处理 试验于2019年7 9月在山东省泰安市祝阳镇中 青葡萄园进行 选用葡萄品种为 阳光玫瑰 Vitis vinifera labrusca cv Shine Muscat 当平均可溶性 固形物 TSS 含量达18 5 Brix时采收葡萄 采后立 刻分别用5和50 mol L 1 褪黑素 含0 05 表面活性 剂Triton X 100 浸果5 s 对照为0 05 Triton X 100 浸果 表面干燥后放入保鲜袋 转入冷库 1 储藏 每个处理设置3个重复 每个重复包含18串果穗 1 2 褪黑素含量测定 取液氮速冻样品置于冷冻干燥机冻干 48 h 加液氮磨成冻干粉 加色谱级甲醇提取24 h 4 12 000 r min离心15 min 收集上清液并用0 22 m 有机滤膜过滤 置于新试管中 用氮吹仪吹干 不 超过40 避光 将蒸干后的物质用3 mL的甲 醇水溶液 5 溶解 0 22 m滤膜过滤到新离心 管中 SPE固相萃取后 经高效液相色谱 质谱 TSQ Quant M Access MAX三重四极杆 检测 主 要检测参数 激发波长 ex 288 nm 发射波长 em 333 nm 流动相 乙腈 水 25 75 V V 流速 0 5 mL min 1 柱温 22 上样量 10 L 通过质 荷比定性褪黑素 制作褪黑素标准曲线 利用外标法 计算褪黑素含量 1 3 糖酸含量测定 用数显糖度计测定果实可溶性固形物 可滴定酸 测定参照国家标准 水果 蔬菜制品可滴定酸度的测 定 GB12293 1990 可溶性糖和有机酸的提取方法参照KEUTGEN 等 19 的方法 取1 0 g葡萄果肉材料 定容于10 mL 离心管中 4 水浴30 min 然后12 000 r min离心15 min 取上清用0 22 m微孔滤膜进行过滤 根据果实 成熟度进行2 10倍稀释 超声波振荡5 min消除气 泡 稀释液用毛细管电泳系统 BeckmanP ACE USA 进行分析 有机酸分离条件 未涂层的石英毛细管80 cm 有 效长度70 cm 75 m i D 分离电压9 kV 检测波 长200 nm 缓冲液为700 mmol L 1 硼酸 90 mmol L 1 磷酸钠 pH 7 5 和0 5 mmol L 1 CTAB 进样压力0 5 Psi 进样时间18 s 直接检测 可溶性糖分离条件 未涂层的石英毛细管20 cm 75 m i D 分离电压 8 kV 检测波长254 nm 缓 冲液为4 mmol L 1 山梨酸钾 10 mmol L 1 磷酸钠 30 mmol L 1 氢氧化钠和0 5 mmol L 1 CTAB 进样压力 0 5 Psi 进样时间3 s 间接检测 1 4 质地测定 使用质构仪 TA XT plus StableMicroSystems UK 测定果实质地 采用P 2n d 2 mm 针状探头 测前速度为2 mm s 1 贯入速度1 mm s 1 脱离速度 10 mm s 1 穿刺深度7 mm 最小感知力5 g 每份样 品随机取50粒新鲜果实 进行整果穿刺试验 选择果 实侧部中心为穿刺点 根据果实成熟度和硬度调节下 降距离为7 8 5 mm 避开种核 20 感应力值的最高 值代表果皮强度 破皮前力值的上升斜率为果实脆度 破皮前力值的积分面积为果实韧性 破皮之后的平均 力值为果肉平均硬度 用质构仪自带软件Texture Exponent 32自动完成数据分析与计算 21 1 5 香气测定 取20 g去籽葡萄样品粉末 液氮冷冻 80 冰 箱保存 转移至50 mL三角瓶中 加入0 5 g NaCl 粉末 0 5 g交联聚乙烯吡咯烷 PVPP 0 5 g D 葡 萄糖酸内酯 3 L浓度为0 822 g L 1 的2 辛醇内标和 磁力转子 迅速用锡箔纸密封好 将完成活化或热解 析过的萃取头 DVB CAR PDMS 插入样品瓶 在 40 200 r min加热搅拌条件下 吸附40 min 取出 萃取头插入气相色谱进样口 250 热解析5 min 仪器 GC MSQP2010Plus气相色谱 质谱联用仪 日本岛津公司 手动SPME进样器 固相微萃取装 置 萃取头 50 30 m CAR DVB PDMS 美国 Supelco公司生产 购于上海安谱科学仪器有限公 司 GC MS分析条件 色谱柱为Rtx 5MS 60 m 0 25 mm 0 25 m 毛细管柱 载气为高纯氦气 流 速为1 27 mL min 1 固相微萃取手动进样 采用不 分流模式 进样口温度250 柱温升温程序 初始 1414 中 国 农 业 科 学 55卷 40 保持2 min 以5 min 1 的速度升温到230 保持5 min 质谱接口温度250 离子源温度230 电离方式EI 电子能量70 ev 全扫描模式 扫描范 围 30 450 U 利用质谱全离子扫描 Scan 图谱 结合NIST17 和WILEY7比对结果及参考相关文献对香气物质进行 定性 采用面积归一化法定量 取3次重复平均值作 为香气物质的相对含量 1 6 广靶代谢组学分析 代谢物提取及分析由迈维生物技术有限公司 武 汉 协助完成 主要试验过程如下 将冷冻干燥的果 实 不含种子 利用研磨仪 MM400 Retsch 研成 粉末 取80 mg 加入20 L 0 3 mg L 1 2 氯苯丙氨酸 内标 和1 mL甲醇 超声提取30 min 20 静止 20 min 13 000 r min 4 离心10 min 取300 L上 清液挥干 然后用400 L甲醇 水 1 4 V V 复溶 涡旋30 s 超声2 min 13 000 r min 4 离心10 min 0 22 m有机相针孔过滤器 SCAA 104 ANPEL 上 海 中国 过滤 滤液用于UPLC ESI MS MS分析 UPLC型号为Shim pack UFLC Shimadzu CBM30A system MS型号为Applied Biosystems 4500 Q TRAP UPLC和MS条件参考GUO等 22 的方法 主要色谱条 件为 色谱柱 ACQUITY UPLC BEH C18 100 mm 2 1 mm 1 7 m 柱温 45 流动相 A 水 含 0 1 甲酸 B 乙腈 甲醇 2 3 v v 含0 1 甲 酸 流速 0 4 mL min 1 进样体积 5 L 主要质 谱条件为 离子源 ESI正负离子扫描模式 Nebulizer Gas GS1 PSI 40 Auxiliary Gas GS2 PSI 40 Curtain Gas CUR PSI 35 Ion Source Temperature 550 Ion Spray Voltage V 5500 正离 子模式 4500 负离子模式 Collision Energy TOF MS scan eV 10 正离子模式 10 负离子模 式 Collision Energy Product Ion scan eV 30 利用迈维数据库 MWDB 鉴定代谢物 按照峰面 积计算代谢物含量 差异代谢物判定标准为VIP variable importance in projection 1且 log2 倍 数变化 1 2 结果 2 1 采后外源褪黑素处理对葡萄果实褪黑素含量的 影响 在室温和低温条件下 外源褪黑素处理均能显著 提高果实褪黑素含量 并且在同一处理时间点上 50 mol L 1 褪黑素处理效果要显著高于5 mol L 1 与室 温处理相比 低温褪黑素处理效果更明显 褪黑素处 理贮藏30 d后 室温条件下 5和50 mol L 1 处理较 对照使果实褪黑素含量分别提高了0 43和2 36倍 而 低温条件下增幅分别为1 58和6 22倍 图1 c c cc cd b c c ab ab b b d bc c c ab ab b b a a a a 0 40 80 120 160 10 20 30 40 褪黑素含量 Mel a t oni n con t ent ng g 1 DW 贮藏时间 Strorage time d RT0 RT5 RT50 LT0 LT5 LT50 RT0 室温 0 mol L 1 褪黑素 RT5 室温 5 mol L 1 褪黑素 RT50 室温 50 mol L 1 褪黑素 LT0 低温 0 mol L 1 褪黑素 LT5 低温 5 mol L 1 褪黑素 LT50 低温 50 mol L 1 褪黑素 不同小写字母表示 处理间差异显著 P 0 05 下同 RT0 0 mol L 1 melatonin at room temperature RT5 5 mol L 1 melatonin at room temperature RT50 50 mol L 1 melatonin at room temperature LT0 0 mol L 1 melatonin at low temperature LT5 5 mol L 1 melatonin at low temperature LT50 50 mol L 1 melatonin at low temperature Different lowercase letters indicate significant differences between treatments P 0 05 The same as below 图 1 不同处理条件下葡萄果实褪黑素含量 Fig 1 The melatonin content in grape berries under different treatments 2 2 褪黑素处理对果实失水率及质地的影响 室温条件下 果实失水率快速增加 在储藏40 d 时达到32 35 低温下 果实失水率大幅度降低 总 体上看 在室温和低温储藏下 褪黑素对果实失水率 未产生显著影响 图2 A 果皮和果肉硬度单果间差 异较大 与室温相比 低温储藏对其无显著影响 褪黑 素处理对果皮和果肉硬度无显著影响 图2 B C 2 3 褪黑素处理对果实糖酸含量的影响 室温条件下 褪黑素对TSS无显著影响 储藏40 d时 5 mol L 1 褪黑素显著增加了葡萄糖和果糖含量 P 0 05 储藏30 d时 50 mol L 1 褪黑素显著 降低了葡萄糖和果糖含量 图3 A C 与室温储藏 相比 低温储藏显著降低了TSS和可溶性糖含量 储 藏40 d时 冷藏果实TSS较室温对照下降17 7 图 3 A 葡萄糖和果糖分别下降29 7 和30 2 图 7期 吕馨宁等 不同温度下褪黑素处理对 阳光玫瑰 葡萄采后品质的影响 1415 果肉硬度 Pulp firmness kg 贮藏时间 Storage time d RT0 RT5 RT50 LT 5 0 LT0 LT5 RT0 RT5 RT50 LT 5 0 LT0 LT5 RT0 RT5 RT50 LT 5 0 LT0 LT5 RT0 RT5 RT50 LT 5 0 LT0 LT5 10 20 30 40 C a a a a a a a a a a a a b b b b c c b b b b b b 0 10 20 30 40 10 20 30 40 失水率 Wat e r los s rate 贮藏时间 Strorage time d RT0 RT5 RT50 LT0 LT5 LT50 果皮硬度 Sk in fi rmn e s s k g RT0 RT5 RT50 LT5 0 LT 0 LT 5 RT0 RT5 RT50 LT5 0 LT 0 LT 5 RT0 RT5 RT50 LT5 0 LT 0 LT 5 RT0 RT5 RT50 LT5 0 LT 0 LT 5 贮藏时间 Storage time d 10 20 30 40 A B 3 B C 低温条件下 两种浓度的褪黑素显著提 高了可溶性糖含量 储藏40 d时增幅达到19 2 以 上 图3 B C 总体上看 室温条件下 5 mol L 1 褪黑素提高了 可滴定酸 苹果酸和酒石酸含量 而50 mol L 1 褪黑 素降低了有机酸含量但无显著影响 图3 D F 与 室温 RT0 相比 低温 LT0 增加了可滴定酸尤 其是苹果酸的含量 而在后期降低了酒石酸含量 图 3 D F 低温条件下 处理30和40 d时 5和50 mol L 1 褪黑素显著降低了可滴定酸和苹果酸含量 P 0 05 仅为对照 LT0 的61 7 和53 5 图 3 D E 而5 mol L 1 褪黑素大幅度降低了苹果酸 含量 酒石酸受褪黑素影响相对较小 仅5 mol L 1 褪黑素在储藏40 d时显著降低了酒石酸含量 P 0 05 图3 F 2 4 褪黑素处理对葡萄果实香气的影响 在室温和低温储藏条件下 随着储藏时间延长 香气总量下降 图4 A 低温大幅降低了香气含量 仅为同期对照的70 4 56 8 室温条件下 在处理 后20 40 d 5 mol L 1 褪黑素对香气总量未产生显著 影响 而50 mol L 1 褪黑素在40 d时显著降低了香气 含量 P 0 05 低温条件下 5 mol L 1 褪黑素在 整个储藏期均显著提高了香气含量 处理后30和40 d 的增幅分别达到对照的2 12和1 6倍 在处理后 20 40 d 50 mol L 1 的褪黑素处理也显著提高了香 气含量 此外 5 mol L 1 褪黑素处理效果显著优于 50 mol L 1 图4 A 就具体香气成分而言 稳定检测到23种香气物质 图4 B 与室温储藏相比 低温储藏降低了葡萄 果实中大部分香气成分的含量 LT0 vs RT0 室温 条件下 褪黑素对不同香气成分产生了不同影响 RT5 vs RT0 RT50 vs RT0 褪黑素可有效提高辛醛 反 式 2 庚烯醛和庚醛的含量 在低温条件下 5 mol L 1 褪黑素在4个时间点上提高了绝大多数香气组分的含 量 LT5 vs LT0 50 mol L 1 褪黑素对香气成分的 影响也以增加为主 LT50 vs LT0 其中 反式 2 庚烯醛 3 甲基 1 丁醇和苯乙醛在各个处理时期提高 幅度较大 反式 2 己烯醛 己醛 里那醇 2 4 二叔 图 2 不同处理条件下果实失水率和质地变化 Fig 2 Changes of water loss rate and texture of grape berries under different treatments 1416 中 国 农 业 科 学 55卷 a ab ab a a a ab a a a a a a b b b a b b b a ab b b 0 10 20 30 可溶性固形物 TSS B rix c bc ab aba a a a c c b a b b a a ab b ab ab b bc b b 0 1 2 3 4 5 可滴定酸含量 Titr atable acid content mg mL 1 a a a b a ab a a a b b b b d c d d c a c c b a b 0 30 60 90 葡萄糖含量 G l ucos e content m g g 1 c c bc c b b b a d d d c a a a a ab ab d d a a a b 0 1 2 3 苹果酸含量 Malic acid content mg g 1 a a a b a a a a a ac b b c d d d bc b c c b c c 0 30 60 90 10 20 30 40 果糖含量 Fr uctos e content m g g 1 b c ab b cd b a a c c b ab b c c c d c d d cd d b c 0 3 6 9 12 10 20 30 40 酒石酸含量 Tarta r ic acid content m g g 1 贮藏时间 Strorage time d 10 20 30 40 10 20 30 40 10 20 30 40 10 20 30 40 A B C D E F 贮藏时间 Strorage time d RT0 RT5 RT50 LT0 LT5 LT50 图 3 不同处理条件下葡萄果实糖酸含量变化 Fig 3 Changes of sugars and acids in grape berries under different treatments 丁基苯酚为玫瑰香型葡萄的特征香气 23 低温条件 下 褪黑素处理显著提高了以上5种物质含量 除50 mol L 1 褪黑素降低了2 4 二叔丁基苯酚含量 其 中5 mol L 1 褪黑素效果更明显 2 5 低温条件下褪黑素诱导的代谢物差异分析 上述研究结果表明 低温条件下 5 mol L 1 褪黑 素处理大幅度提高了香气含量 为了探讨其提高香气 物质的代谢基础 选择效果最为显著的处理后30 d的 样品进行代谢组比较分析 主成分分析表明 对照和 褪黑素处理6个生物学重复分别聚在一起 表明重复 性较好 此外 对照和褪黑素处理对应数据分布在不 同象限 表明褪黑素处理对代谢产物产生了较大影响 在对照和处理果实中 共检测到3 215种物质 依据 筛选标准 OPLS DA模型第一主成分的VIP值 1 T检验的P value值 0 05 共鉴定到232种差异代 谢物 其中115种差异代谢物受褪黑素处理而含量上 调 117种下调 差异代谢物代谢通路分析表明 16 个代谢途径显著改变 P 0 05 11个代谢途径极 7期 吕馨宁等 不同温度下褪黑素处理对 阳光玫瑰 葡萄采后品质的影响 1417 b a c b ab a c b a ab cd c d c d c c a a a cd b b b 1000 2000 3000 10 20 30 40 总香气含量 T o ta l ar o m a c o n t e n t ng 3 N onano ne g 1 FW 0 RT0 RT5 RT50 LT0 LT5 LT50 A LT0 vs RT0 RT5 vs RT0 RT50 vs RT0 LT5 vs LT0 LT50 vs LT0 10 20 30 4010 20 30 4010 20 30 4010 20 30 4010 20 30 40 DAS 6 10 5 21 4 31 3 42 2 52 1 63 0 73 0 16 1 06 1 95 2 85 3 74 4 64 5 54 6 43 反式 2 己烯醛 E 2 hnal 己醛Hexanal 壬醛Nonanal 癸醛Decanal 辛醛Octanal 反式 2 庚烯醛 E 2 heptenal 庚醛Heptanal 3 甲基 1 丁醇3 methyl butanal 苯乙醛Phenylacetaldehyde 香叶醛Geranial 乙醇Ethanol 正己醇1 hexanol 順式 2 己烯醇 Z 2 hn 1 ol 里那醇Linalool 2 乙基己醇2 ethyl 1 hexanol 反式 2 己烯醇 E 2 hn 1 ol 甲基庚烯酮6 methyl 5 hepten 2 one 甲苯Toluene 乙苯Ethylbenzene 2 2 4 trimethyl 1 3 pentanediol diisobutyrate 丙烯酸丁酯Butyl acrylate 1 己烯1 Hne 2 4 二叔丁基苯酚2 4 Di tert butylphenol B 热图数据来自于log 2 倍数变化 下同 The heat map was made based on log2 fold change 图 4 不同处理对葡萄果实香气含量的影响 Fig 4 Changes of aroma amounts in grape berries under different treatments 显著改变 P 0 01 变化最大的5个代谢途径为氨 基酸生物合成 biosynthesis of amino acids 氨酰基 tRNA生物合成 aminoacyl tRNA biosynthesis 精 氨酸生物合成 arginine biosynthesis 丙氨酸 天冬 氨酸和谷氨酸代谢 aspartate and glutamate metabolism 及苯基丙氨酸代谢 phenylal